The role of PKR, Osterix, and Calcineurin in osteogenesis

PKR、Osterix 和钙调磷酸酶在成骨中的作用

• 批准号: 21592330
• 负责人: HANEJI Tatsuji
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21592330/
• 关键词: 蛋白質脱リン酸化; 蛋白質リン酸化; 破骨細胞; 骨吸収; 軟骨細胞; PKR; RANKL; RAW264.7細胞; タンパク質脱リン酸化; タンパク質リン酸化; 骨形成; オステリックス; カルシニューリン; オカダ酸; カリクリンA

A dominant-negative mutant PKR cDNA, in which the amino acid lysine at 296 was replaced with arginine, was transfected into RAW264. 7 cells. RANKL stimulated the TRAP-positive multinuclear cell formation in RAW264. 7 cells. However, TRAP-positive multinuclear cells were not formed in the PKR-K/ R mutant cells even when the cells were stimulated with higher doses of RANKL. A specific inhibitor of PKR, 2-aminopurine, also suppressed the RANKL-induced osteoclast differentiation in RAW264. 7 cells. Immunohistochemical study shows that PKR localized in osteoclasts of metatarsal bone of newborn mouse.ATDC-5 cells differentiated into chondrocytes by the insulin-treatment and the cells produced Alcian blue-positive cartilage matrix. When the cells were treated with 2-aminopurine, formation of cartilage matrix decreased in a dose dependent manner. Protein expression of STAT1, Osterix, and Sox-9 showed different manners during chondrogenesis. We also showed that PKR localized in a marginal region of mandibular condyle cartilage in mouse embryo.Our findings suggest that PKR plays important roles in the differentiation of osteoclasts and chondrocytes by modulating STAT1, OSX, and Sox-9 expressions.

将显性失活突变体 PKR cDNA 转染至 RAW264，其中 296 位氨基酸赖氨酸被精氨酸取代。 7 个细胞。 RANKL 刺激 RAW264 中 TRAP 阳性多核细胞的形成。 7 个细胞。然而，即使用更高剂量的RANKL刺激PKR-K/R突变细胞，TRAP阳性多核细胞也没有形成。 PKR 的特异性抑制剂 2-氨基嘌呤也抑制 RAW264 中 RANKL 诱导的破骨细胞分化。 7 个细胞。免疫组织化学研究表明PKR定位于新生小鼠跖骨的破骨细胞中。ATDC-5细胞经胰岛素处理分化为软骨细胞，并产生阿尔新蓝阳性软骨基质。当用2-氨基嘌呤处理细胞时，软骨基质的形成以剂量依赖性方式减少。 STAT1、Osterix 和 Sox-9 的蛋白表达在软骨形成过程中表现出不同的方式。我们还发现 PKR 位于小鼠胚胎下颌骨髁软骨的边缘区域。我们的研究结果表明 PKR 通过调节 STAT1、OSX 和 Sox-9 的表达在破骨细胞和软骨细胞的分化中发挥重要作用。

项目成果

PKR-mediated degradation of STAT1 regulates osteoblast differentiation

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2009.02.003
• 发表时间: 2009-07-15
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Yoshida, Kaya;Okamura, Hirohiko;Haneji, Tatsuji
• 通讯作者: Haneji, Tatsuji

蛋白質脱リン酸化反応とアポトーシス

蛋白质去磷酸化和细胞凋亡

• 发表时间: 2011
• 作者: 羽地達次;森本景之
• 通讯作者: 森本景之

カリクリンAによるMG63細胞のアポトーシス誘導, I-κBの分解, NF-κBのリン酸化

Calyculin A 诱导 MG63 细胞凋亡、I-κB 降解、NF-κB 磷酸化

• 发表时间: 2009
• 作者: 羽地達次;田中宏明;岡村裕彦;吉田賀弥;森本景之;羽地達次
• 通讯作者: 羽地達次

オカダ酸誘導アポトーシスとB23の分解

冈田酸诱导细胞凋亡和 B23 降解

• 发表时间: 2011
• 作者: 平島寛司;他
• 通讯作者: 他

PKR変異型骨芽細胞株における蛋白質脱リン酸化酵素阻害剤によるアポトーシス誘導とIκBの発現

蛋白磷酸酶抑制剂在 PKR 突变成骨细胞系中诱导细胞凋亡和 IκB 表达

• 发表时间: 2009
• 作者: 羽地達次;寺町順平;岡村裕彦;吉田賀弥;森本景之
• 通讯作者: 森本景之