活性型Rasはがん化の維持に必要か

活跃的 Ras 是维持癌变所必需的吗？

基本信息

批准号：
13214023
负责人：
勝木元也
金额：
$ 4.61万
依托单位：
Okazaki National Research Institutes
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214023/
关键词：
Ras H-Ras N-Ras K-Ras 活性型Ras トランスジェニックマウス Cre loxP

项目摘要

Ras遺伝子は、ヒトや実験動物のがんから活性型Rasタンパク質を生じる点突然変異が頻繁に検出される。H-rasは膀胱がん、肺がん、皮膚がん、K-rasは、大腸がん、膵臓がん、N-rasは、血液がんでの変異率が高いことが知られている。本研究では、活性化型H-ras遺伝子を、条件を設定して発現するトランスジェニックマウスを作成し、活性化型H-Rasの発がんにおける役割を、分子生物学的に解析した。活性型H-ras遺伝子の、プロモーター領域にloxP配列で挟んだ、スペーサー配列を設定して、Cre遺伝子を持つ別のトランスジェニックマウスと交配した時のみに活性型遺伝子を発現するトランスジェニックマウスを作成した。このマウスは、正常に成長し、寿命も、正常のマウスと比較してほぼ同じであった。しかし、Cre遺伝子を、カルモジュリンキナーゼII遺伝子のプロモーター支配下に発現する遺伝子導入トランスジェニックマウスと交配した結果、四肢の掌や、顔、などに大きな乳頭腫が発生した、この乳頭腫を調べたところ、すべてにおいて、導入遺伝子のスペーサー領域がCreによって失われており、しかも、活性型H-Rasが発現していた。一方、本来このマウスにおいてCreが発現している、脳の海馬では、確かに活性型H-Rasが発現していたに拘わらず、組織の増成は認められなかった。以上のことから、組織によって、H-Rasの活性化が直接細胞の増殖を促すものと、海馬のようにH-Rasの活性化だけでは細胞の増殖に結びつかないものもあることが明らかとなった。現在、一旦、がん化した細胞にCre遺伝子を導入して、がん化が消えるか否かについて検討中である。

Ras 基因中产生活性 Ras 蛋白的点突变经常在人类和实验动物癌症中检测到。已知H-ras在膀胱癌、肺癌、皮肤癌中突变率较高，K-ras在结肠癌和胰腺癌中突变率较高，N-ras在血癌中突变率较高。在这项研究中，我们创建了在特定条件下表达激活的H-Ras基因的转基因小鼠，并从分子角度分析了激活的H-Ras在致癌过程中的作用。通过在活性 H-ras 基因的启动子区域中的 loxP 序列之间设置间隔序列，我们创建了一种转基因小鼠，该小鼠仅在与另一只携带 Cre 基因的转基因小鼠交配时才表达活性基因。与正常小鼠相比，这些小鼠生长正常，寿命相似。然而，由于培育了在钙调蛋白激酶 II 基因启动子控制下表达 Cre 基因的转基因小鼠，在所有情况下，四肢的手掌和面部的间隔区域都出现了大的乳头状瘤。转基因被Cre丢失，并且表达活性H-Ras。另一方面，尽管活跃的 H-Ras 确实表达，但在小鼠的大脑海马体（Cre 最初表达的地方）中没有观察到组织生长。由上可知，根据组织的不同，H-Ras的活化直接促进细胞增殖，而在海马等其他组织中，仅H-Ras的活化不会导致细胞增殖。目前，我们正在研究将Cre基因引入已发生癌变的细胞中是否可以消除癌变状态。