Site-specific incorporation of non-natural amino acids into proteins by using pyrrolysyl-tRNA synthetase

使用吡咯赖氨酰-tRNA 合成酶将非天然氨基酸位点特异性掺入蛋白质中

• 批准号: 21550167
• 负责人: YANAGISAWA Tatsuo
• 金额: $ 3万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21550167/
• 关键词: バイオテクノロジー; 非天然型アミノ酸; タンパク質; クロスリンカー; ケミカルバイオロジー; 翻訳; ピロリジン; アミノアシルtRNA合成酵素; tRNA; 翻訳後修飾; アミノアシル-tRNA合成酵素; 有用性官能基; ピロリジル-tRNA合成酵素

Site-specific incorporation of N^ε-(p-trifluoreomethyldiazirinylbenzyloxycarbonyl) lysine(TmdZLys), a new lysine derivative with a diazirine photo-crosslinker, into proteins has been achieved by the pyrrolysyl-tRNA synthetases(PylRS)/tRNA^<Pyl> system. The incorporated TmdZLys enabled wide-range photo-crosslinking with target proteins. This system is useful for probing protein interaction networks in living cells.

通过吡咯赖氨酰-tRNA 合成酶 (PylRS)/tRNA^<Pyl> 将 N^ε-(对三氟甲基二氮丙啶基苄氧基羰基) 赖氨酸 (TmdZLys)（一种带有二氮丙啶光交联剂的新型赖氨酸衍生物）定点掺入蛋白质中整合的 TmdZLys 能够与目标蛋白进行广泛的光交联。该系统可用于探测活细胞中的蛋白质相互作用网络。

项目成果

終止コドンUAGがセンス・コドンに再定義された大腸菌株を用いた非天然型アミノ酸のタンパク質への導入

使用大肠杆菌菌株将非天然氨基酸引入蛋白质中，其中终止密码子 UAG 已被重新定义为有义密码子

• 发表时间: 2011
• 作者: 坂本健作;安達仁朗;若森昌聡;白水美香子;梅原崇史;柳沢達男;向井崇人;横山茂之
• 通讯作者: 横山茂之

翻訳後修飾アミノ酸のタンパク質への部位特異的導入

将翻译后修饰的氨基酸定点引入蛋白质中

• 发表时间: 2009
• 作者: 坂本健作;小林隆嗣;柳沢達男;横山茂之
• 通讯作者: 横山茂之

新規非天然型アミノ酸とその応用に関する研究: N(epsilin)-(p-trifluoromethyldiazirinylbenzylo xycarbonyl) lysine

新型非天然氨基酸及其应用的研究：N(epsilin)-(对三氟甲基二氮丙啶基苯甲基羰基)赖氨酸

ライフサイエンス新着論文レビュー:リジル-tRNA合成酵素パラログGenX-YjeKシステムによる翻訳因子EF-Pのリジル化修飾

新生命科学论文综述：赖氨酰-tRNA 合成酶旁系同源基因 GenX-YjeK 系统对翻译因子 EF-P 的赖氨酰修饰

• 发表时间: 2010
• 作者: 柳沢達男;横山茂之
• 通讯作者: 横山茂之

新規な非天然型アミノ酸、及びその利用(N^ε-(p-trifluoromethyldia zirinylbenzyloxycarbonyl)-lysine)

新型非天然氨基酸及其用途（N^ε-(对三氟甲基二氮杂苯甲氧羰基)-赖氨酸）

• 发表时间: 2011