魚類の末梢器官に存在する新規光受容体の同定と機能解析:下垂体は光を感じるか?

鱼类外周器官中新型光感受器的鉴定和功能分析：垂体能感知光吗？

基本信息

批准号：
20658044
负责人：
飯郷雅之
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Utsunomiya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20658044/
关键词：
末梢器官光受容体下垂体脳オプシンホルモン甲状腺

项目摘要

末梢器官の光受容体の実体は何か?末梢器官の光受容体はすべての魚類に普遍的に存在するのであろうか?また,もしもすべての魚類に普遍的に存在するならば末梢器官に存在する光受容体はいかなる機能を果たしているのであろうか?これらの疑問にこたえるべく,本年度は以下の項目について検討した.1.機能的ゲノミクスによるゼブラフィッシュ末梢器官の新規光受容体の同定とその情報伝達系の解析ゼブラィッシュ培養線維芽細胞株BRF41に光照射を行い,0,0.5,1,2,3時間後にRNAを採取した.対照群として暗条件で培養した細胞からもRNAを採取し,DNAマイクロアレイ(Gene Chip)を用いたトランスクリプトーム解析により発現が光誘導を示す遺伝子網羅的に同定した.さらに,マイクロアレイにより同定された遺伝子群の光誘導をリアルタイム定量PCRにより確認した.2.下垂体は光を感じるか?新規光受容体が成長,生殖など多くの生理機能を制御する内分泌腺である下垂体に発現していれば,魚類の恒常性の確立・維持に関わる多様な生理機能の制御に新規光受容体が関与する可能性が極めて高くなる.そこで,本研究では下垂体に注目し,下垂体自身が新規光受容体を発現してホルモン分泌の制御に関わっている可能性を検証するため,サクラマスを対象にオプシン遺伝子の網羅的cDNAクローニングを行い,それらが下垂体に発現するかどうかRT-PCRにより検討した.その結果,あるオプシン遺伝子が下垂体に発現している可能性が示唆された.

外周器官中的光感受器到底是怎样的？外周器官中的光感受器是所有鱼类中普遍存在的吗？还有，如果它们普遍存在于所有鱼类中，那么外周器官中光感受器到底起什么作用呢？为了回答这些问题问题，今年我们调查了以下几项。1利用功能基因组学鉴定斑马鱼外周器官中的新型光感受器并分析其信号转导系统用光照射斑马鱼培养的成纤维细胞系BRF41，0、0.5、1、2和3小时后释放RNA作为对照组。，还从黑暗中培养的细胞中收集 RNA 并在 DNA 微阵列上进行分析（基因我们通过微阵列（芯片）的转录组分析全面鉴定了光诱导表达的基因。此外，我们利用实时定量PCR证实了微阵列鉴定的基因的光诱导作用。2．你能感觉到吗？如果一种新的光感受器在脑垂体中表达，脑垂体是一种控制生长和繁殖等许多生理功能的内分泌腺，它可能是控制与建立和维持相关的各种生理功能的新方法。鱼的体内平衡。因此，在本研究中，我们以垂体为研究对象，验证垂体本身表达新的光感受器并参与激素分泌控制的可能性。我们对樱桃鲑鱼的视蛋白基因进行了全面的cDNA克隆，并检查了它们是否存在。 RT-PCR结果表明，垂体中可能表达某种视蛋白基因。