リコンビナントウイルス様中空粒子(VLP)を用いたHIVワクチンの開発

使用重组病毒样空心颗粒（VLP）开发艾滋病毒疫苗

• 批准号: 12035209
• 负责人: 保富 康弘
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12035209/
• 关键词: HIV; VLF; ワクチン; 粘膜免疫

1.リコンビナントVLP:E型肝炎ウイルス(HEV)のウイルス様中空粒子(VLP)に外来遺伝子挿入可能な位置を決定するためにTag(HSV B cell epitope)を用いVLPの形成を検討したところ、4カ所の疎水性領域でTag組み込みVLPが形成されることが示された。このことより挿入可能部位で最もVLP産制の多い部位にHIVenv中和抗体エピトープ(HIV308-322,RIQRGPGRAFVTIGK)を挿入したVLPを作製し、マウスに経口投与したところVLPに対するのと同様に消化管内および血清中にHIVenv特異抗体の産制が認められた。これら抗体は血清中よりも消化管内溶液で高く、消化管内ではIgAが中心であった。2.DNAワクチン封入VLP:HEV-VLPをHIVenv DNA添加バッファー内でEDTAでCa^<2+>をキレートし、VLPの各分子間を広げその後Ca^<2+>を添加しHIVenv DNAを封入したHIVenvDNA封入VLPを作製した。このHIVenv DNA封入VLPをマウスに経口投与したところ血清中および消化管内溶液中にHIVenv特異的抗体の産制が認められた。さらにHIVenv特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)が誘導された。HIVenv特異抗体では消化管内溶液中が血清中より高く、CTLも脾細胞より腸間膜リンパ節で高く誘導された。以上のことよりVLPを用いた2法によるワクチンは全身的のみならず粘膜免疫に強い抗HIV効果をもたらすことが期待された。

1.重组VLP：为了确定外源基因可以插入到戊型肝炎病毒（HEV）的病毒样空心颗粒（VLP）中的位置，我们利用Tag（HSV B细胞表位）研究了VLP的形成，并发现4表明在几个疏水区域形成了标签整合的VLP。基于此，我们创建了一种将 HIVenv 中和抗体表位（HIV308-322，RIQRGPGRAFVTIGK）插入到可能的插入位点中 VLP 产量最高的位点的 VLP，当将其口服给小鼠时，发现它在胃肠道中发现了病毒颗粒，并且在血清中观察到了 HIVenv 特异性抗体的产生。这些抗体在胃肠道溶液中的含量高于血清中的水平，并且胃肠道中以 IgA 为主。 2.DNA疫苗封装的VLP：将HEV-VLP与HIVenv DNA添加缓冲液中的EDTA螯合，以分散每个VLP分子之间的空间，然后添加Ca 2+ 封装HIVenv DNA，得到封装HIVenvDNA的VLP。准备好了。当这种 HIVenv DNA 封装的 VLP 被口服给予小鼠时，在血清和胃肠道溶液中观察到 HIVenv 特异性抗体的产生。此外，还诱导了 HIVenv 特异性细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL)。胃肠道溶液中的 HIVenv 特异性抗体高于血清中的水平，肠系膜淋巴结中的 CTL 诱导程度也高于脾细胞中的水平。综上所述，预计使用VLP的二法疫苗不仅对全身免疫而且对粘膜免疫也具有很强的抗HIV作用。

项目成果

Seth,A.,Yasutomi,Y.,Jacoby,H., et al.: "Evaluation of a lipopeptide immunogen as a therapeutic in HIV type 1-seropositive individuals."AIDS Res.Hum.Retroviruses.. 16. 337-343 (2000)

Seth,A.、Yasutomi,Y.、Jacoby,H. 等人：“脂肽免疫原作为 HIV 1 型血清阳性个体治疗的评估。”AIDS Res.Hum.Retroviruses.. 16. 337-343

Mori,K.,Yasutomi,Y.,Sawada,S., et al.,: "Short-term treatment with a novel RT inhibitor induces an attenuated vaccine effect able to contain a pathogenic SHIV-RT virus."J.Virol.. 74. 5747-5753 (2000)

Mori,K.、Yasutomi,Y.、Sawada,S. 等人：“用新型 RT 抑制剂进行短期治疗可诱导减弱的疫苗效果，从而能够抑制致病性 SHIV-RT 病毒。”J.Virol。

Matsumoto,J.,Kawai,S.,Terao,K., et al.,: "Malaria infection induces rapid elevation of soluble Fas ligand level in serum and subsequent T lymphocytepenia : possible factors responsible for the differences in susceptibility of two speiceis of Macaca monkey

Matsumoto,J.、Kawai,S.、Terao,K. 等人：“疟疾感染导致血清中可溶性 Fas 配体水平快速升高并随后导致 T 淋巴细胞减少：导致两种疟疾物种易感性差异的可能因素

Kamei,A.,Tamaki,S.,Taniyama,H., et al.,: "Induction of hepatitis C vinus specific cytotoxic T lymphocytes in mice by an intrahepatic inoculation with an expression plasmid."Virology. 273. 120-126 (2000)

Kamei,A.、Tamaki,S.、Taniyama,H.等人：“通过肝内接种表达质粒诱导小鼠丙型肝炎病毒特异性细胞毒性T淋巴细胞。”病毒学。

Uno-Furuta,S.,Tamaki,S.,Takebe,Y., et al.,: "Inductoin of virus-specific cytotoxic T lymphocytes by in vivo electric administration of peptides."Vaccine. (印刷中).

Uno-Furuta, S.、Tamaki, S.、Takebe, Y. 等人：“通过体内电施用肽来诱导病毒特异性细胞毒性 T 淋巴细胞”。疫苗（正在印刷中）。