Entwicklung einer umfassenden Methode zur schnellen Identifizierung von Mikroorganismen in Umweltmatrices mittels MALDI-MS

开发使用 MALDI-MS 快速识别环境基质中微生物的综合方法

• 批准号: 5372758
• 负责人: Professorin Dr. Bettina Warscheid
• 金额: --
• 依托单位: Biozentrum der Universität Würzburg
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5372758?language=en
• 关键词: Entwicklung; einer; umfassenden; Methode; zur

Ziel des Forschungsvorhabens ist die Entwicklung einer analytischen Methode zur schnellen und zuverlässigen Identifizierung von Mikroorganismen (Bakterien, Sporen, Viren) in Luft und Wasser. Unter Einsatz der MALDI-TOF-MS (Matrix-unterstützte Laser Desorption/Ionisation Flugzeitmassenspektrometrie) soll jeweils ein Modellmikroorganismus für gram-positive und gram-negative Bakterien, deren Sporen sowie für Viren untersucht werden. Im Rahmen des Forschungsprojektes soll sowohl die Analysengeschwindigkeit erhöht werden als auch eine höhere Zuverlässigkeit, Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit der massenspektrometrisch-gestützten Methode erreicht werden. Hierbei wird eine durchschnittliche Analysenzeit von zwei Minuten angestrebt, wobei weniger als 5000 Zellen die sichere Identifizierung der Mikroorganismen gewährleisten sollen. Kernpunkte der hierzu geplanten Arbeiten stellen Entwicklungen im Bereich der Probenahmetechnik als auch der Probenaufbereitung für Mikroorganismen dar. So soll durch den Einsatz spezifischer Oberflächen (biocapture surfaces), die z. B. aus Nitrocellulose-, Polycarbonat- oder Polyestermembranen und Agar, Polymyxin oder immobilisierten Zuckern zusammengesetzt sind, die Anreicherungseffizienz als auch Selektivität der Probenahme von Mikroorganismen in komplexen Umweltmatrices signifikant gesteigert werden. Die zu entwickelnden Oberflächen sind dabei unter anderem hinsichtlich ihrer spezifischen Fähigkeit zur Anreicherung von Mikroorganismen bei reversibler Entfernung von Störkomponenten wie z. B. von Salzen zu beurteilen oder in bezug auf ihre Beständigkeit und Neigung zu Interferenzen bei der Aufnahme von Massenspektren mittels MALDI zu prüfen. Innerhalb des Projektes ist vorgesehen, die neuen Probenahmetechniken in ein miniaturisiertes und größtenteils automatisiertes MALDI-TOF-MSSystem zu implementieren und für Feldmessungen zu testen.

MALDI-TOF-MS（基质激光解吸/电离） Flugzeitmassenspektrometrie）是革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌微生物模型中的珠宝，是孢子的来源，是微生物的来源。 Zuverlässigkeit、Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit der Massenspektrometrisch-gestützten Methode erreicht werden。 Mikroorganismen gewährleisten sollen。硝化纤维素、聚碳酸酯或聚酯膜和琼脂、多粘菌素或固定剂是在复杂的环境矩阵中对微生物样本进行选择的Anreicherungseffizienz。 Oberflachen sind anderem hinsichtlich ihrer spezifischen Fähigkeit zur Anreicherung von Mikroorganismen bei reversibleer Entfernung von Störkomponenten wie z。项目的内部部分是最新的、微型和大型自动化 MALDI-TOF-MS 系统的新 Probenahmetechniken，用于实施和测试。