ラット前庭迷路における血液-内耳関門の発達

大鼠前庭迷路血-内耳屏障的发育

基本信息

批准号：
11671672
负责人：
鈴木光也
金额：
$ 2.3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2000
项目状态：
已结题

项目摘要

蝸牛および半規管膨大部の血液-内耳関門の発達を調べる目的で、内耳毛細血管の内皮細胞内のvesicular transportの変化を観察した。Vesicular transportの変化を形態学的に観察するため、陽性荷電物質であるpolyethyleneimineをトレーサーとして用いた。ネンブタール腹腔内投与による全身麻酔下に、生後1日目から3週間目のラットおよび成熟ラットの大腿静脈により0.1%polyethyleneimine(PEI)溶液を投与した。1時間大気中に放置した後、2%glutaraldehyde と1%phosphotangstic acid溶液にて還流固定を行った。蝸牛および半規管膨大部をエポン包埋した後、H800型透過型電子顕微鏡にて基底膜上のPEI粒子の分布を観察した。それぞれの未発達ラットと成熟ラットにおける毛細血管基底膜上のPEI粒子の分布は、血管条、ラセン靭帯、半規管膨大部において比較された。成熟ラットの毛細血管基底膜にはPEI粒子はほとんど認められなかった。このことは、成熟ラットの内耳毛細血管には選択的透過性が存在することを示唆している。未発達ラットにおける毛細血管基底膜のPEI粒子の分布は、血管条では生後 12-14日、ラセン靭帯では生後7-11日、半規管膨大部では生後4-7日で成熟ラットのレベルに達した。この結果より、ラットの血液―内耳関門は、少なくとも生後14日目までは完成しないこと、また蝸牛と前庭迷路の間で、血液―内耳関門の発達が異なることが示唆された。次の段階としては、感覚上皮下の基底膜上に存在するPEI粒子の変化についても観察する。

为了研究耳蜗和半规管壶腹血液-内耳屏障的发育，我们观察了内耳毛细血管内皮细胞内囊泡运输的变化。为了从形态上观察囊泡运输的变化，我们使用带正电的物质聚乙烯亚胺作为示踪剂。生后1～3周龄大鼠和成年大鼠在全身麻醉下腹腔注射戊巴比妥，经股静脉注射0.1%聚乙烯亚胺（PEI）溶液。将其在空气中放置1小时后，用2％戊二醛和1％磷酸唐酸溶液回流固定。将耳蜗和半规管壶腹植入Epon后，使用H800透射电子显微镜观察PEI颗粒在基底膜上的分布。比较了未成熟大鼠和成年大鼠毛细血管基底膜上PEI颗粒在血管纹、螺旋韧带和半规管壶腹的分布。成年大鼠毛细血管基底膜中几乎未观察到PEI颗粒。这表明成年大鼠的内耳毛细血管中存在选择性通透性。未成熟大鼠毛细血管基膜中PEI颗粒的分布在生后12-14天的血管纹、生后7-11天的螺旋韧带、半圆壶腹部达到成年大鼠的水平出生后 4-7 天进行根管治疗。这些结果表明，大鼠的血液-内耳屏障至少在出生后14天才完成，并且耳蜗和前庭迷路之间的血液-内耳屏障的发育不同。下一步是观察感觉上皮下方基底膜上 PEI 颗粒的变化。