メタスチンニューロンの生殖内分泌および生殖行動修飾の同時制御機構

转移蛋白神经元对生殖内分泌和生殖行为改变的同时控制机制

基本信息

批准号：
08J10112
负责人：
神田真司
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

脊椎動物を通じて,kiss1に加え,kiss2遺伝子が存在し,いずれもメタスチン受容体に結合することが他の研究室の発表論文から明らかになった。そこで,申請者は,それぞれのメタスチンニューロン群への性ステロイドの入力を検討することにより,左kiss1,kiss2の機能の差異の研究に着手した。kiss2とkiss1の発現ダイナミックスを比較することにしたが,神経核レベルでの遺伝子発現量の比較が必須となった。そこで,申請者はDIG標識in situ hybridization法のアルカリホスファターゼによる発色が酵素反応によることを利用し,半定量的に発現を比較する方法を新たに開発した。その差を共著者と共同し明白に示し,結果を論文発表した。また,in situ hybridizationとの二重染色などで極めて慎重に特異性を検討した抗体を用いた免疫組織化学による線維投射と,受容体の分布を併せ,論文投稿中である。先行研究からメタスチンが制御すると研究当初考えられていた(その可能性は申請者により否定された)GnRH2ニューロンからの脊椎動物を通じて初めての電気記録を解析した論文を,共著者と論文発表した。当初予定していた,メタスチンニューロンが介在ニューロンを介してGnRHニューロンに作用している可能性の検証に関しては,kiss2遺伝子の登場により,優先順位が前後し,はっきりとした結果は得られていないが,kiss1,kiss2ニューロンの解析により,脊椎動物メタスチンの進化的意義をより深く洞察することができ,結果としてより予定より多くの収穫があったと考えている。

其他实验室发表的论文表明，除了 Kiss1 之外，脊椎动物中还存在 Kiss2 基因，并且两者都与肿瘤转移蛋白受体结合。因此，申请人着手通过检查性类固醇对每个转移蛋白神经元组的输入来研究左吻1和左吻2之间的功能差异。当我们决定比较 Kiss2 和 Kiss1 的表达动态时，有必要比较神经元核水平的基因表达水平。因此，申请人利用DIG标记原位杂交方法中碱性磷酸酶显色是由于酶促反应的事实，开发了一种半定量比较表达的新方法。我和我的合著者一起清楚地证明了其中的差异，并在论文中发表了结果。此外，我们目前正在提交一篇关于使用免疫组织化学进行纤维投射和受体分布的论文，该论文使用的抗体的特异性已通过原位杂交双染色进行了非常仔细的检查。我和我的合著者发表了一篇论文，其中我们分析了脊椎动物 GnRH2 神经元的第一个电记录，根据之前的研究，最初认为 GnRH2 神经元受到转移蛋白的调节（申请人否认了这种可能性）。关于原计划验证转移蛋白神经元通过中间神经元作用于GnRH神经元的可能性，由于kiss2基因的出现而改变了优先顺序，并且尚未获得明确的结果，我们认为对kiss1和kiss2神经元的分析允许。我们深入了解脊椎动物转移蛋白的进化意义，结果我们获得了超出预期的成果。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kisspeptin neurons act closely but indirectly on GnRH 1 neurons via local interneurons but not on GnRH 2 or 3 neurons in medaka

Kisspeptin 神经元通过局部中间神经元密切但间接地作用于 GnRH 1 神经元，但不作用于青鳉中的 GnRH 2 或 3 神经元

DOI：
发表时间：
2009
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kanda S;Akazome Y;Okubo K;Okamura H;Oka Y.
通讯作者：
Oka Y.

Quantitative expression profiling of kiss1 and its receptor in the teleost medaka

硬骨鱼青鳉中 Kiss1 及其受体的定量表达谱

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Okubo;K.;Kanda;S.;Oka;Y.
通讯作者：
Y.

Functional and evolutionary insights into vertebrate kisspeptin systems from studies of fish brain

DOI：
10.1111/j.1095-8649.2009.02496.x
发表时间：
2010-01-01
期刊：
JOURNAL OF FISH BIOLOGY
影响因子：
2
作者：
Akazome, Y.;Kanda, S.;Oka, Y.
通讯作者：
Oka, Y.

ミドリフグにおけるkiss2遺伝子の脳内発現分布

绿河豚kiss2基因的脑表达分布

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
0
作者：
三谷優太;神田真司;赤染康久;岡良隆
通讯作者：
岡良隆

Electrophysiological and anatomical characterization of three distinct GnRH neuronal populations in the GFP transgenic medaka

GFP 转基因青鳉中三个不同 GnRH 神经元群的电生理学和解剖学特征

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kanda;S.;Okubo;K.;Isomae;S.;Abe;H.;Kobayashi;D.;Takeda;H.;Aida;K.;Nagahama;Y.;Oka;Y.
通讯作者：
Y.

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作者：
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通讯作者：
水田尚志・岡林佑太・細井公富・横山芳博・成田正直