マウス卵形成過程における発生能獲得の分子機構に関する研究

小鼠卵子发生过程中发育潜能获得的分子机制研究

• 批准号: 08J07943
• 负责人: 井上 梓
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J07943/
• 关键词: Nucleoplasmin 2; Nucleolus-like body; 精子クロマチン脱凝集; 発生能; 卵母細胞; 核小体; Nucleoplasmin 2(NPM2); Nucleolar-like body(NLB); RNAi; マウス; マウス卵母細胞; Npm2

哺乳類の卵母細胞は成長過程で受精後の発生を遂行する能力(発生能)を獲得するが、その分子的実体はまったくわかっていない、本研究の目的は、卵子の発生能に関与する因子を同定し、発生能獲得の分子メカニズムを解明することである。発生能の実体を解明することは胚の発生能を高める方法の開発に貢献し、特に畜産や不妊治療の分野に多大な意義をもつもの思われる。本研究では、哺乳類の卵にのみ存在し発生に必須であることが知られているものの、その構成成分や機能がまったくわかっていない核小体様構造体Nuclcolus-like body (NLB)に着目した.昨年度までにNLBの主要構成因子はNucleoplasmin 2 (NPM2)という初期発生に必須なタンパク質であることを、単離したNLBに対する質量分析により解明した。今年度は初期発生におけるNPM2の機能解析を行った。NPM2ノックアウトマウスの受精卵を詳細に観察したところ、受精後卵内に侵入した精子クロマチンの脱凝集が遅延することがわかった。同様の表現型はNLBを顕微操作により除去した卵においても観察された。そしてその表現型はNPM2 mRNAの顕微注入により回復すること、recombinant NPM2タンパク質によりin vitroにおいて精子クロマチンを脱凝集できることを明らかにした。この成果は哺乳類において精子脱凝集関連因子を同定した初めての例であり、今後精子の脱凝集メカニズムのさらなる解明に繋がるだろう。

哺乳动物卵母细胞在生长过程中获得施肥后进行发育的能力，但其分子实体根本不知道。这项研究的目的是确定与卵发育能力有关的因素，并阐明达到发育能力的分子机制。了解发展潜力的实质有助于发展胚胎发育的方法的发展，并且可能具有重要意义，尤其是在牲畜和不育治疗领域。在这项研究中，我们专注于核素样体（NLB），这是一种仅存在于哺乳动物卵中的核仁酚样结构，对于发育至关重要，但对其成分或功能不了解。到去年，我们已经通过质谱分离的NLB上的质谱法阐明了NLB的主要成分，NLB的主要成分，一种称为核纤维蛋白2（NPM2）的蛋白质。今年，我们分析了NPM2在初次暴发期间的功能。当我们详细观察到NPM2基因敲除小鼠的受精卵时，发现在延迟了受精后进入卵的精子染色质的分解。在通过微结构去除NLB的卵中也观察到了类似的表型。然后表明表型通过NPM2 mRNA的显微注射恢复表型，并且重组NPM2蛋白可以在体外脱离精子染色质。这是第一次在哺乳动物中鉴定出与精子分类相关的因子，并将进一步阐明未来的精子分解机制。

项目成果

マウス卵母細胞核小体形成における Nucleoplasmin 2(NPM2)の役割

核纤蛋白 2 (NPM2) 在小鼠卵母细胞核仁形成中的作用

• 发表时间: 2009
• 作者: Inoue A;Aoki F.;井上梓
• 通讯作者: 井上梓

マウス卵母細胞の核小体形成における Nucleoplasmin 2(NPM2)の機能解析

核蛋白 2 (NPM2) 在小鼠卵母细胞核仁形成中的功能分析

• 发表时间: 2009
• 作者: Inoue A;Aoki F.;井上梓;井上梓
• 通讯作者: 井上梓

Involvement of nucleolus-like body in the decondensation of sperm chromatin at fertilization

核仁样体参与受精时精子染色质的去浓缩

• 发表时间: 2010
• 作者: Inoue A;Aoki F.
• 通讯作者: Aoki F.

Contribution of the oocyte nucleus and cytoplasm to the determination of meiotic and developmental competence in mice

• DOI: 10.1093/humrep/den096
• 发表时间: 2008-06-01
• 期刊: HUMAN REPRODUCTION
• 影响因子: 6.1
• 作者: Inoue, Azusa;Nakajima, Rui;Aoki, Fugaku
• 通讯作者: Aoki, Fugaku

The Contribution of Germinal Vesicle Materials to the Determ ination of Developmental Competence in Mouse Oocytes

生发囊泡材料对确定小鼠卵母细胞发育能力的贡献

• 发表时间: 2008
• 作者: Inoue A;Aoki F.;井上梓;井上梓;Azusa Inoue
• 通讯作者: Azusa Inoue