酵母細胞内におけるセラミドの動態に関する研究

酵母细胞中神经酰胺的动力学研究

• 批准号: 08J04662
• 负责人: 梶原 健太郎
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J04662/
• 关键词: セラミド; GPIアンカー型タンパク質; セラミド; GPIアンカー型タンパク質

セラミドは小胞体で合成された後、ゴルジ体へと輸送される(このセラミド輸送は輸送小胞を介する小胞輸送と、これを介さない非小胞輸送の2つの経路から構成されている。しかし小胞体からゴルジ体へのセラミド輸送の詳細な機構は不明のままである。本研究では、細胞内の脂質恒常性が異常になっている変異株を用いて、セラミド輸送の解析をおこない、以下の結果を得ていた。1)セラミド小胞輸送にオキシステロール結合タンパク質Oshが関与する。2)このセラミド小胞輸送はグリコシルフォスファチジルイノシトール(GPI)アンカータンパク質との共輸送ではない。本年度は、これらの結果を踏まえて、小胞体からのセラミド輸送におけるOshタンパク質のさらなる機能解析をおこなった。(研究1)Oshタンパク質が関与するセラミド輸送とタンパク質輸送の関連を解析した。その結果、Osh破壊株では分泌タンパク質であるカルボキシペプチダーゼ(CPY)の細胞内輸送に異常は認められなかった。これに対して、脂質マイクロドメインに局在するトリプトファントランスポーター(Tat2-mRFP)の小胞体からの輸送に損傷が生じていた。よって、Oshタンパク質が関与するセラミド小胞輸送は脂質マイクロドメインに局在するタンパク質との共輸送であると考えられた。(研究2)タンパク質輸送損傷時のOshタンパク質の関与を解析した。その結果、OSH遺伝子を破壊することによって、小胞体-ゴルジ体間を循環するタンパク質GFP-Rer1の輸送の損傷が部分的に抑圧された。よって、Oshタンパク質はTat2-mRFP以外のタンパク質の輸送に対しては負に制御している可能性が示唆された。(総括)以上の結果から、小胞体からのセラミドの小胞輸送は特定のタンパク質との共輸送であり、両者間に相互制御する関係が存在すると考えられた。

神经酰胺是在内质网中合成的，然后转运到高尔基体（该神经酰胺的运输由两种途径组成：通过囊泡和非叶子运输的囊泡运输，而不是通过此途径运输。但是，通过这种cer依的cernain stram cernal centram cernears cernears cernement。细胞内的脂质稳态，并获得了以下结果：1）氧蛋白酶结合蛋白OSH参与神经酰胺囊泡的转运。 2）该神经酰胺囊泡的转运不是与糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚固蛋白共转运。基于这些结果，我们对内质网的神经酰胺转运过程中的OSH蛋白进行了进一步的功能分析。 （研究1）分析了涉及OSH蛋白的神经酰胺转运与蛋白转运之间的关联。结果，在OSH破坏菌株中分泌的蛋白羧肽酶（CPY）的细胞内转运中未观察到异常。相反，色氨酸转运蛋白转运蛋白（TAT2-MRFP）的转运损坏了内质网的脂质微域。因此，涉及OSH蛋白的神经酰胺囊泡的转运被认为是与位于脂质微域的蛋白共转运。 （研究2）分析了蛋白质转运损伤期间OSH蛋白的参与。结果，内质网和高尔基体之间循环的蛋白GFP-RER1的运输损害通过破坏OSH基因而部分抑制。因此，建议OSH蛋白可能对TAT2-MRFP以外的蛋白质的运输负面调节。 （摘要）基于上述结果，人们认为神经酰胺从内质网的转运是与特定蛋白的共转移，并且它们之间存在相互调节的关系。