リアルタイム分子動態解析システムを用いた抗癌剤感受性因子の特定とその臨床応用

实时分子动力学分析系统识别抗癌药物敏感性因素及其临床应用

• 批准号: 24791463
• 负责人: 津谷 康大
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24791463/
• 关键词: 抗癌剤耐性; オーダーメード治療

【はじめに】がん治療成績向上には薬剤に対する細胞応答と耐性機序を解明することが重要である.ヒト胃癌細胞のメタボロームを網羅的に解析することにより,5-RIの作用と耐性因子を検討した.【方法と結果】5-FU感受性が異なる2種類のヒト胃癌細胞株に5-FUを曝露したのち経時的に細胞を回収し,メタノール抽出した液体クロマトグラフィー質量分析法(LC-MS)を用いて,細胞内の低分子動態を一斉解析した.ヒト胃癌細胞株の分析結果よりm/z50～1000の範囲で約700(個のピークを検出できたそのうち特定のアミノ酸代謝と脂質代謝は2種の細胞株間で特徴的な動態を示した.これらの代謝を媒介する酵素に対してRT-PCRを行い,発現量を解析した.【考察】メタボローム解析によりヒト胃癌細胞株の5-FU曝露による細胞内応答を追跡することが可能であった5-FUの作用には特定のアミノ酸代謝と脂質代謝が特徴的であり,薬剤耐性に関与していることが示唆された.また、5FU投与によるFANCJタンパクの減少がoxaliplatinの作用を増強させることを胃癌細胞床で確認したこれは5FU耐性株においては確認されなかった。この所見により5m感受性細胞株ではoxaliplatinとの併用効果の可能性があることが示唆された。また、5-FU耐性株においてその代謝酵素OPRTの発現低下が5-FU耐性機構に関与していると考えられたが現在Stage I非小細胞肺癌切除例においてOPRTを含めた5-FU代謝酵素の発現を免疫染色にて検討し、これらの酵素の発現と術後無再発生存斑間との関連を検討中である。OPRT発現と術後補助療法(5-FU系薬剤)の効果に関連性が認められれば今後OPRTの発現の有無により5-FU系薬剤の使用を考慮するというオーダーメード治療が実現する可能性が考えられる。

[简介]重要的是要阐明对药物的细胞反应以及对药物的抗药性机制，以改善癌症治疗结果。通过全面分析人类胃癌细胞的代谢组，研究了5-RI的效果和抗性因子。 [方法和结果]暴露于5-FU向具有不同5-FU敏感性的两种不同的人类胃癌细胞系后，随着时间的推移收集细胞，并使用甲醇提取的液相色谱质谱法（LC-MS）同时分析细胞内的小分子动力学。基于人类胃癌细胞系的分析结果，在M/z 50至1000的范围内检测到约700个峰，其中特定的氨基酸代谢和脂质代谢在两个细胞系之间显示出独特的动力学。 RT-PCR用于治疗介导这些新陈代谢的酶。分析了表达水平。 [讨论]代谢组学分析表明，5-FU的作用能够跟踪5-FU暴露于人类胃癌细胞系的细胞内反应，并且建议特定的氨基酸代谢和脂质代谢是5-FU作用的特征，并且与耐药性有关。此外，在胃癌细胞床中证实，使用5FU给药的FANCJ蛋白的降低增强了奥沙利铂的作用。这在5FU抗性菌株中尚未证实。这一发现表明，它可能与5m敏感细胞系中的奥沙利​​铂联合有效。还认为，5-FU抗性菌株中代谢酶OPRT表达的降低参与5-FU抗性的机制，但目前是阶段。我已经研究了使用免疫染色的5-FU代谢酶在非小细胞肺癌切除术中的表达，这些酶的表达与术后幸存者的无复发生存之间的关系正在研究。如果发现OPRT表达和辅助治疗（5-FU药物）的作用是相关的，则可能会在将来考虑使用5-FU药物的定制治疗方法，取决于OPRT是否表达。

项目成果

メタボローム解析によるヒト胃癌細胞株の抗がん薬に対する細胞内分子応答および耐性因子の探索

通过代谢组分析寻找人胃癌细胞系抗癌药物的细胞内分子反应和耐药因子

• 发表时间: 2012
• 作者: 佐々木健;奥村浩;内門泰斗;喜多芳昭;松本正隆;大脇哲洋;石神純也;上野真一;夏越祥次;清水利昭;竹之内和則;橋口照人;Mori R;笹田伸介
• 通讯作者: 笹田伸介

Decreased FANCJ caused by 5FU contributes to the increased sensitivity to oxaliplatin in gastric cancer cells.

• DOI: 10.1007/s10120-012-0191-0
• 发表时间: 2013-07
• 期刊: GASTRIC CANCER
• 影响因子: 7.4
• 作者: Mori, Ryutaro;Yoshida, Kazuhiro;Tanahashi, Toshiyuki;Yawata, Kazunori;Kato, Junko;Okumura, Naoki;Tsutani, Yasuhiro;Okada, Morihito;Oue, Naohide;Yasui, Wataru
• 通讯作者: Yasui, Wataru