ヒト多能性幹細胞から有毛細胞分化誘導の高効率化

高效诱导人多能干细胞分化为毛细胞

• 批准号: 23592481
• 负责人: 戎 富美
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23592481/
• 关键词: マウス多能性幹細胞; Wntシグナル; ダイレクト法; 有毛細胞作成; 感覚毛; 内耳有毛細胞作製; マウスES細胞; 内耳前駆細胞; Myosin7a陽性細胞; 高効率化; ヒトiPS細胞; 臨床応用

昨年度に引き続き、今年度もマウス多能性幹細胞から機能的内耳有毛細胞への分化誘導に必要な因子を同定することを目標とした。昨年度は内耳有毛細胞作成において二つの先行する論文の実験アプローチを参考に以下の結果が得られた。１．内耳前駆細胞から有毛細胞への分化誘導にはWntシグナルが必要である。２．マウス多能性幹細胞をIGF1とEGF存在下で培養した結果、有毛細胞マーカーのひとつであるMyosin7a陽性細胞の作成がみられた。内耳有毛細胞形成においてはまず受精卵が分裂を繰り返し、多能性細胞が生じる。その後外胚葉が形成され、外胚葉から内耳前駆細胞へと分化し、内耳前駆細胞から機能的有毛細胞が形成される。これらの個々のクリティカルな発生過程すべてにおいてWntシグナルは関与していることがこれまでに報告されているから、Wntを含む3シグナル因子存在下でマウス多能性幹細胞の培養を試みた結果、有毛細胞らしき細胞の作成が認められた。さらにその再現性も確認できた。

继去年之后，今年的目标是确定诱导小鼠多能干细胞分化为功能性内耳毛细胞所需的因素。去年，我们基于前两篇论文的实验方法在内耳毛细胞的创建方面获得了以下结果。 1. Wnt 信号是诱导内耳祖细胞分化为毛细胞所必需的。 2.当小鼠多能干细胞在 IGF1 和 EGF 存在的情况下培养时，观察到毛细胞标记物 Myosin7a 呈阳性的细胞。在内耳毛细胞的形成过程中，受精卵首先经历反复分裂，产生多能细胞。然后外胚层形成并分化为内耳祖细胞，然后形成功能性毛细胞。由于据报道 Wnt 信号参与所有这些单独的关键发育过程，因此我们尝试在包括 Wnt 在内的三种信号传导因子存在的情况下培养小鼠多能干细胞，并发现看起来像是毛细胞的细胞的产生被观察到。此外，其再现性也得到了证实。