環境水中の塩分と脂肪酸代謝酵素の相互作用の解明

阐明环境水中的盐与脂肪酸代谢酶之间的相互作用

基本信息

批准号：
19658080
负责人：
佐藤秀一
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Tokyo University of Marine Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19658080/
关键词：
脂質環境生理学動物

项目摘要

ニベの脂肪酸鎖長延長酵素を既報の魚類の鎖長延長酵素に相同性の高い塩基配列に対してdegenerateなプライマーを作成し、RACE法により塩基配列を同定した。また、ニベ成魚の肝臓から作製した2000個のcDNAクローンからexpressed sequence tagをもとにして、ニベ脂肪酸不飽和化酵素の完全長塩基配列を決定した。ニベ脂肪酸不飽和化酵素は、既報のヨーロッパヘダイ脂肪酸不飽和化酵素6の塩基配列と86%が一致し(93%が類似)、魚類脂肪酸不飽和化酵素の特徴である1338塩基対の非翻訳領域および2か所の膜貫通領域を持つことが明らかとなった。また、ニベ脂肪酸鎖延長酵素の塩基配列は、既報のスギ脂肪酸鎖延長酵素5と93%が一致し、885塩基対の非翻訳領域を持つことが明らかとなった。両遺伝子は、近隣結合法により魚類脂肪酸不飽和化酵素6および脂肪酸鎖延長酵素5に分類された。ニベ脂肪酸不飽和化酵素は、ニベ成魚の脳、鰓、肝臓、脾臓、膵臓、胃、腸、卵巣および精巣に発現が見られ、脳および肝臓における発現が他の組織よりも高かった。一方、ニベ脂肪酸鎖延長酵素は、脳、鰓、心臓、肝臓、膵臓、脾臓、胃、腸、卵巣および精巣で発現が見られた。発現仔魚にオレイン酸またはDHAで栄養強化したアルテミアを給餌して15日間給餌すると、オレイン酸強化アルテミアを摂餌したニベでは成長および生残が有意に劣り(P<0.05)、脂肪酸組成はオレイン酸またはDHAを強化アルテミアを摂餌したニベでは、体組織中のDHAレベルは総脂質中0.2および1.4%であった。さらに、差長延長酵素の発現に差は見られなかったものの、オレイン酸強化アルテミアを給餌した仔魚では不飽和化酵素の発現亢進が見らた。以上の結果から、ニベ脂肪酸不飽和化酵素は、餌中の高度不飽和脂肪酸の欠乏によりネガティブフィードバックを受けることが示唆された。

针对黄花鱼脂肪酸链延长酶的核苷酸序列制作简并引物，该酶与之前报道的鱼类脂肪酸链延长酶高度同源，并采用RACE方法对其核苷酸序列进行鉴定。此外，根据从成年黄花鱼肝脏制备的2000个cDNA克隆的表达序列标签，确定了黄花鱼脂肪酸去饱和酶的全长核苷酸序列。黄花鱼脂肪酸去饱和酶与之前报道的欧洲红鱼脂肪酸去饱和酶6的碱基序列有86%的同一性（93%相似性），含有1338个非翻译碱基对，这是鱼类脂肪酸去饱和酶的特征。跨膜区和两个跨膜区。此外，Croivet脂肪酸链延长酶的碱基序列与之前报道的日本柳杉脂肪酸链延长酶5有93%的同一性，并揭示其具有885个碱基对的非翻译区。通过邻接法将这两个基因分类为鱼脂肪酸去饱和酶6和脂肪酸链延长酶5。黄花鱼脂肪酸去饱和酶在成年黄花鱼的脑、鳃、肝、脾、胰、胃、肠、卵巢和睾丸中均有表达，且脑和肝中的表达量高于其他组织。另一方面，在黄花鱼的脑、鳃、心脏、肝脏、胰腺、脾、胃、肠、卵巢和睾丸中观察到了脂肪酸链延长酶的表达。当表达的仔鱼饲喂富含油酸或DHA的卤虫15天时，饲喂富含油酸的卤虫的黄花鱼的生长和存活率显着较差（P<0.05），并且脂肪酸组成低于油酸。在喂食富含 DHA 的卤虫的黄鱼中，身体组织中的 DHA 水平分别占总脂质的 0.2% 和 1.4%。此外，虽然在延伸酶的表达方面没有观察到差异，但在喂食富含油酸的卤虫的幼鱼中观察到去饱和酶的表达增加。上述结果表明，黄花鱼脂肪酸去饱和酶由于饲料中缺乏多不饱和脂肪酸而受到负反馈。

项目成果

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Cloning and nutritional regulation of polyunsaturated fatty acid desaturase and elongase of the marine teleost nibe croaker, Nibea mitsukurii

海洋硬骨鱼尼贝黄花鱼多不饱和脂肪酸去饱和酶和延伸酶的克隆及营养调控

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
Fisheries Science Online
影响因子：
0
作者：
Yamamoto;Y.;Kabeya N;Takeuchi Y;Alimuddin;Haga Y;Satoh S;Takeuchi T;Yoshizaki G.
通讯作者：
Yoshizaki G.

Influence of low salinity and dietary fatty acids composition on biosynthesis potency of highly unsaturated fatty acid

低盐度和膳食脂肪酸组成对高度不饱和脂肪酸生物合成效能的影响