受容体RANKにより制御される破骨細胞分化メカニズムの包括的解明

全面阐明受体RANK控制的破骨细胞分化机制

基本信息

批准号：
17K10999
负责人：
田口祐
金额：
$ 3万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-01 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

RANKの新規機能領域HCRの生理的機能を明らかにするために、HCRを欠失したRANKを発現する遺伝子改変マウス（HCR欠損マウス）を作出し、解析を行った。組織学的解析とマイクロCT解析の結果、HCR欠損マウスの骨は骨髄腔にまで硬組織が多く存在するなど野生型マウスの骨に比べて著しく骨量が増加していた。また、HCR欠損マウスから破骨前駆細胞を採取して検討したところ、野生型マウス由来細胞に比べて分化能が著しく低下していることがわかり、HCRが生理的条件下で破骨細胞分化に重要な役割を担っていることが示唆された。更に、シグナル伝達経路を解析したところHCRを欠失したRANKを刺激してから1時間以内のシグナル伝達においては野生型と差が見られず、HCRが生理的条件下でどのように分化に関与するかは今後の長時間シグナルの解析が必要であると判断した。また、RANK刺激で破骨細胞分化するRAW細胞をRANK刺激依存的に細胞死を起こすように改変した。そこにCRISPR/Cas9 Libraryを利用した網羅的な遺伝子欠損を起こさせ破骨細胞分化制御に関与する遺伝子の解明を目指した。その結果複数の候補遺伝子を得ているが、そのうち1つの遺伝子の欠損マウスの破骨前駆細胞の分化能を解析したところ、野生型細胞と比較して分化能に差が認められた。現在当該遺伝子欠損マウスの更なる解析を進め本遺伝子の骨代謝における生理的な役割の解明を目指している。

为了阐明HCR的生理功能，HCR的新型功能区域是从HCR中删除的，表达等级的转基因小鼠（HCR缺陷小鼠）的生理功能。组织学和MicroCT分析表明，与野生型小鼠相比，HCR缺陷小鼠的骨骼质量显着增加，骨髓腔中存在更多的硬组织。此外，当收集破骨细胞前体细胞并从HCR缺陷型小鼠中检查时，发现与从野生型小鼠中得出的细胞相比，它们的分化能力显着降低，这表明HCR在物理条件下在骨质分化中起重要作用。此外，在分析信号通路时，在刺激HCR缺陷等级的1小时内没有发现差异，并且确定未来的长期信号分析对于确定HCR在生理条件下如何参与分化是必要的。此外，通过秩刺激区分破骨细胞的原始细胞被修饰，以秩刺激依赖性方式导致细胞死亡。然后，我们旨在使用CRISPR/CAS9文库阐明基因缺陷，以阐明与破骨细胞分化调节有关的基因。结果，获得了多个候选基因，但是当分析缺乏这些基因之一的小鼠中破骨细胞祖细胞的分化潜力时，与野生型细胞相比，分化潜力的差异被观察到。目前，正在对基因缺陷小鼠进行进一步分析，以阐明该基因在骨代谢中的生理作用。

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Wellcome Sanger Institute(United Kingdom)

威康桑格研究所（英国）

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

TRAF6 maintains mammary stem cells and promotes pregnancy-induced mammary epithelial cell expansion

TRAF6 维持乳腺干细胞并促进妊娠诱导的乳腺上皮细胞扩张

DOI：
10.1038/s42003-019-0547-7
发表时间：
2019
期刊：
Communications Biology
影响因子：
5.9
作者：
Yamamoto Mizuki;Abe Chiho;Wakinaga Sakura;Sakane Kota;Yumiketa Yo;Taguchi Yuu;Matsumura Takayuki;Ishikawa Kosuke;Fujimoto Jiro;Semba Kentaro;Miyauchi Maki;Akiyama Taishin;Inoue Jun-ichiro
通讯作者：
Inoue Jun-ichiro

破骨細胞形成の細胞融合におけるTRAF6依存性分子機構の解明

阐明破骨细胞生成过程中细胞融合中 TRAF6 依赖性分子机制

DOI：
发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
0
作者：
弓桁　洋;田口　祐;井上　純一郎
通讯作者：
井上　純一郎

Dr Kosuke Yusa | Group Leader

游佐幸介博士 |

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

新規破骨細胞分化制御遺伝子スクリーニング系の構築

破骨细胞分化调节基因筛选体系的构建

DOI：
发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
0
作者：
中野裕希;田口祐;井上純一郎
通讯作者：
井上純一郎

DOI：
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期刊：
影响因子：
0
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通讯作者：
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发表时间：
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影响因子：
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通讯作者：
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发表时间：
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期刊：
影响因子：
0
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Qin;J.;Gohda J;Maezawa Y;Sharma RK;Ito H;Yamamoto T;Maezawa Y;Sharma RK;Ito H;Yamamoto T;Maezawa Y;Sharma RK;Ito H;Yamamoto T;井上純一郎;Jun-ichiro Inoue;仙波憲太郎;秋山泰身;松村隆之;山崎孔輔;Kosuke Yamazaki;茂木秀彦;山口憲孝;田口祐;Yuu Taguchi;長谷川恵一;尾山大明;田口祐;秦裕子
通讯作者：
秦裕子