ｉＰＳ細胞由来ＣＴＬ療法における自殺遺伝子ｉＣａｓｐａｓｅ９による安全性確保

确保 iPS 细胞衍生的 CTL 疗法中自杀基因 iCaspase9 的安全性

• 批准号: 15J40133
• 负责人: 安藤 美樹
• 金额: $ 1.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J40133/
• 关键词: iPS細胞由来CTL; 若返りT細胞; EBウイルス; 自殺遺伝子

2013年に我々の研究室ではHIV1感染患者のウイルス特異的CTLよりiPS細胞を樹立し (T-iPS細胞と呼ぶ)、そのT-iPS細胞より再びHIV1特異的キラーT細胞を誘導することに成功した。誘導されたCTLはもとの抗原特異性を保ちつつ、より高い増殖能とテロメア長の伸展を認め機能的な若返りを認めた。このiPS細胞由来若返りキラーT細胞をがんの治療に臨床応用するため、副作用発現時に細胞死を誘導できる自殺遺伝子iCaspase9(iC9)による安全システムを導入した。このiC9が組み込まれたiPS細胞由来キラーT細胞のin vivoでの実際の抗腫瘍効果を確かめた。ルシフェラーゼで標識したEBウイルス感染リンパ腫細胞を、免疫不全マウスに腹腔内注射し腫瘍樹立後、腫瘍サイズを生体内蛍光イメジングで定期的に評価した。iC9-iPS細胞由来EBウイルス特異的キラーT細胞で治療したマウスグループでは効果的に腫瘍を縮小させた。また、この若返りキラーT細胞を投与したマウスは、末梢血由来のオリジナルT細胞を投与したマウスに比較し、生存期間の延長も認めた。更にiC9安全システムについてもin vivoで有効に働くことを確認した。Day0にルシフェラーゼで標識したiC9-iPS由来EBウイルス特異的キラーT細胞を腹腔内注射後、蛍光イメジングで追跡した。投与されたT細胞は腫瘍を認識し増殖を続けるが、ダイマライザーを投与したマウスでは３日後にシグナルがほぼ消失した。iC9安全システムは効率よくiPS細胞由来T細胞にアポトーシスを誘導でき、あらゆる過程で起こりうる副作用をコントロール可能であると示すことができた。これらの結果を2015年８月に“Stem Cell Reports”に発表し、臨床応用に向けて大きく前進した。

2013年，我们的实验室从HIV1感染者的病毒特异性CTL中建立了iPS细胞（称为T-iPS细胞），并再次成功地从这些T-iPS细胞中诱导出HIV1特异性杀伤T细胞。诱导的CTL保持了其原有的抗原特异性，表现出更高的增殖能力和增加的端粒长度，并且功能得到恢复。为了将这些源自 iPS 细胞的再生杀伤性 T 细胞临床应用于癌症治疗，我们引入了一种使用自杀基因 iCaspase9 (iC9) 的安全系统，该系统可以在副作用发生时诱导细胞死亡。含有iC9的iPS细胞衍生杀伤T细胞在体内的实际抗肿瘤作用得到证实。将荧光素酶标记的 EBV 感染的淋巴瘤细胞腹腔注射到免疫缺陷小鼠体内，肿瘤建立后，通过体内荧光成像定期评估肿瘤大小。在用 iC9-iPS 细胞衍生的 EB 病毒特异性杀伤 T 细胞治疗的小鼠组中，肿瘤得到有效缩小。与使用外周血来源的原始 T 细胞治疗的小鼠相比，使用这些恢复活力的杀伤性 T 细胞治疗的小鼠的存活时间也更长。此外，我们还证实了iC9安全系统在体内有效发挥作用。第 0 天，腹腔注射用荧光素酶标记的 iC9-iPS 衍生的 EB 病毒特异性杀伤 T 细胞，然后进行荧光成像。施用的 T 细胞识别肿瘤并继续增殖，但在施用二聚体的小鼠中，三天后信号几乎消失。我们能够证明 iC9 安全系统可以有效诱导 iPS 细胞衍生的 T 细胞凋亡，并控制所有过程中可能出现的副作用。这些成果于2015年8月发表在《干细胞报告》上，向临床应用迈出了重大进展。

项目成果

A Safeguard System for Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Rejuvenated T Cell Therapy.

• DOI: 10.1016/j.stemcr.2015.07.011
• 发表时间: 2015-10-13
• 期刊: Stem cell reports
• 影响因子: 5.9
• 作者: Ando M;Nishimura T;Yamazaki S;Yamaguchi T;Kawana-Tachikawa A;Hayama T;Nakauchi Y;Ando J;Ota Y;Takahashi S;Nishimura K;Ohtaka M;Nakanishi M;Miles JJ;Burrows SR;Brenner MK;Nakauchi H
• 通讯作者: Nakauchi H

ウイルス関連腫瘍に対するiPS細胞由来若返りCTL療法の臨床応用実現への試み

尝试实现iPS细胞再生CTL治疗病毒相关肿瘤的临床应用

• 发表时间: 2015
• 作者: 安藤 美樹;西村 聡修;山崎 聡;山口 智之;Malcolm K Brenner;中内 啓光
• 通讯作者: 中内 啓光

Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Rejuvenated T-Cell Therapy with Suicide Gene-based Safeguard System

具有基于自杀基因的保障系统的诱导多能干细胞再生 T 细胞疗法

• 发表时间: 2015
• 作者: Miki Ando;Toshinobu Nishimura;Satoshi Yamazaki;Malcolm K. Brenner and Hiromitsu Nakauchi
• 通讯作者: Malcolm K. Brenner and Hiromitsu Nakauchi

“Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Rejuvenated T-Cell Therapy with Suicide Gene-based Safeguard System”

“具有基于自杀基因的保障系统的诱导多能干细胞再生 T 细胞疗法”

• 发表时间: 2015
• 作者: Miki Ando;Toshinobu Nishimura;Satoshi Yamazaki;Malcolm K. Brenner and Hiromitsu Nakauchi
• 通讯作者: Malcolm K. Brenner and Hiromitsu Nakauchi

再生医療用語ハンドブック

再生医学术语手册

• 发表时间: 2015
• 作者: Baimakhanov Z;Yamanouchi K;Sakai Y;Koike M;Soyama A;Hidaka M;Takatsuki M;Fujita F;Kanetaka K;Kuroki T;Eguchi S.;山之内孝彰（分担）
• 通讯作者: 山之内孝彰（分担）