歯髄幹細胞特性を応用した効率的組織再生療法の臨床応用ロジスティクス

利用牙髓干细胞特性高效组织再生治疗的临床应用物流

基本信息

批准号：
15H05047
负责人：
山田陽一
金额：
$ 10.98万
依托单位：
Aichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-01 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15H05047/
关键词：
再生医療再生医学歯髄幹細胞骨再生臨床応用

项目摘要

顎顔面外科領域では外傷や腫瘍、口蓋裂、歯周病等により骨欠損に直面する機会が多いが、依然自家骨移植がスタンダードであり、低侵襲な新規治療法の確立が求められている。近年、幹細胞を用いた再生医療の研究が進められているが、実際に臨床応用、実用化されている再生医療はまだ数少ないのが現状である。我々はこれまでに再生医療を用いた基礎研究および前臨床研究にて、不要となった智歯、乳歯などの歯から得られる歯髄に幹細胞が存在し、骨再生に有効であること、骨造成能はすでに臨床実績のある骨髄由来間葉系幹細胞と同等であり、効果的であることを示してきた。本研究では、歯髄幹細胞を用いた効率的な組織再生法を確立し、臨床応用へと発展させることを目的として研究を実施した。本年度は、細胞治療に際して重要なウエイトを占め、安全性と高い品質管理が必要となる細胞調整プロセッシングに関して、GMP基準に準拠した細胞プロセッシングセンター（cell processing center：CPC）においても最適条件の検討を行った。歯髄採取、歯髄幹細胞培養の最適化を行い、各種感染性試験、核型分析試験等、培養細胞の安全性ならびに細胞特性について検討を加えた。その結果、好気培養培地（BACTEC PLUS + Aerobic/F）および嫌気培養培地（BACTEC PLUS + Anaerobic/F）を用いた無菌検査では、いずれも陰性を示した。また、マイコプラズマ否定試験にて陰性、エンドトキシン検査においては第一六改正日本薬局方に沿った基準値以下であった。さらに、核型分析試験でも明らかな異常を認めなかった。フローサイトメトリーによる細胞表面抗原解析では、CD29、CD44、CD73等の間葉系幹細胞マーカー陽性が確認された。以上の結果より、CPC内における細胞プロセッシングの安全性および品質が確認され、臨床応用の実現に向けた培養法が確立された。

在颌面外科领域，我们经常遇到因外伤、肿瘤、腭裂、牙周病等导致的骨缺损，但自体骨移植仍然是标准，需要建立新的微创治疗方法。近年来，利用干细胞进行再生医学的研究不断取得进展，但目前真正应用于临床或投入实际使用的再生医学仍然很少。通过利用再生医学的基础和临床前研究，我们发现从不再需要的智齿和乳牙等牙齿中获得的牙髓中存在干细胞，它们能有效促进骨再生并具有骨形成能力已被证明与骨髓间充质干细胞等效且有效，并且已得到临床证明。在本研究中，我们进行研究的目的是建立一种利用牙髓干细胞的有效组织再生方法并将其开发到临床应用。今年，我们还将研究符合细胞调整处理 GMP 标准的细胞处理中心 (CPC) 的最佳条件，细胞调整处理是细胞治疗的重要组成部分，需要安全性和高质量控制。我们优化了牙髓采集和牙髓干细胞培养，并通过各种感染性测试、核型分析测试等研究培养细胞的安全性和细胞特性。结果，使用需氧培养基（BACTEC PLUS + Aerobic/F）和厌氧培养基（BACTEC PLUS + Anaerobic/F）的无菌测试显示阴性结果。此外，支原体检查呈阴性，内毒素检查低于第16版日本药典规定的标准值。此外，核型分析检测未发现明显异常。通过流式细胞术进行的细胞表面抗原分析证实了间充质干细胞标记物（例如 CD29、CD44 和 CD73）呈阳性。上述结果证实了CPC细胞处理的安全性和质量，并建立了临床应用的培养方法。