Studies on glycosylation of chitinase secreted by marine bacteria

海洋细菌分泌的几丁质酶糖基化的研究

• 批准号: 19780163
• 负责人: ITOI Shiro
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19780163/
• 关键词: キチナーゼ; 海洋細菌; 糖鎖修飾; 結晶キチン; Vibrio proteolyticus; α型結晶キチン

海洋細菌Vibrio proteolyticus由来キチナーゼの分子量が明らかに理論値よりも大きいことから、翻訳後修飾の可能性が高いと考え、研究を進めた。当該タンパク質の大腸菌組換え体が複数のレクチンを用いるレクチンブロッティングにより陽性反応を示した。また、850アミノ酸からなる当該組換えキチナーゼの一次構造のうち、C末端側250アミノ酸を欠損する組換え体を作製し、レクチンブロッティングを試みた結果、C末端側欠損組換え体でも陽性反応が認められ、この領域中に糖鎖修飾部位が存在する可能性が示唆された。

由于来自海洋细菌解蛋白弧菌的几丁质酶的分子量明显大于理论值，我们认为存在翻译后修饰的可能性很高，并继续进行我们的研究。通过使用多种凝集素进行凝集素印迹，该蛋白质的大肠杆菌重组体显示出阳性反应。此外，在由850个氨基酸组成的重组几丁质酶的一级结构中，我们创建了删除C末端250个氨基酸的重组体，并尝试进行凝集素印迹，结果即使在重组体中也观察到阳性反应。有人认为该区域可能存在糖基化位点。

项目成果

Purification, characterization and cloning of Vibrio parahaemolyticus chitinolytic enzymes and application to oligosaccharide production

副溶血弧菌几丁质分解酶的纯化、表征和克隆及其在寡糖生产中的应用

• 发表时间: 2008
• 期刊: Journal of Applied Glycoscience 55
• 作者: Kazunari Kadokura;Yusuke Sakamoto;Akiko Rokutani;Takanori Ikegami;Takao Hirano;Mahiro Yamamoto;Kaori Saito;Wataru Hakamata;Shiro Itoi;Haruo Sugita;Tadatake Oku and Toshiyuki Nishio
• 通讯作者: Tadatake Oku and Toshiyuki Nishio

Identification of a novel endochitinase from a marine bacterium Vibrio proteolyticus strain No. 442.

• DOI: 10.1016/j.bbapap.2007.06.003
• 发表时间: 2007-09
• 期刊: Biochimica et biophysica acta
• 作者: S. Itoi;Y. Kanomata;Yuki Koyama;K. Kadokura;S. Uchida;T. Nishio;T. Oku;H. Sugita

海洋細菌Vibrio proteolyticus由来キチナーゼのpH依存性に及ぼすC末端領域の影響

C端区域对海洋细菌解蛋白弧菌几丁质酶pH依赖性的影响

• 发表时间: 2007
• 作者: 鹿股悠奈;糸井史朗;門倉一成;西尾俊幸;奥忠武;杉田治男
• 通讯作者: 杉田治男

Purification and characterization of Vibrio parahaemolyticus extracellular chitinase and chitin oligosaccharide deacetylase involved in the production of heterodisaccharide from chitin

• DOI: 10.1007/s00253-006-0831-6
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: APPLIED MICROBIOLOGY AND BIOTECHNOLOGY
• 影响因子: 5
• 作者: Kadokura, K.;Rokutani, A.;Nishio, T.
• 通讯作者: Nishio, T.

海洋細菌Vibrio proteolyticus由来エンドキチナーゼの精製および活性におよぼすC末端領域の影響

C端区域对海洋细菌解蛋白弧菌内切几丁质酶纯化及活性的影响

• 发表时间: 2007
• 作者: 鹿股悠奈;糸井史朗;内田晋輔;門倉一成;西尾俊幸;奥忠武;杉田治男
• 通讯作者: 杉田治男