The study on the function of synovial sarcoma related SYT/SSX fusion gene against Aurora genes and its application for molecular targeting therapy

滑膜肉瘤相关SYT/SSX融合基因抗Aurora基因的功能研究及其在分子靶向治疗中的应用

• 批准号: 19890088
• 负责人: MASUDA Takahiro
• 金额: $ 1.97万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19890088/
• 关键词: 遺伝子; 滑膜肉腫; 分子生物学; ゲノム; マウスモデル; 癌

悪性骨軟部腫瘍は小児に高頻度で見られ、現在でもなお生命予後不良で治療へむけた研究は大きく遅れている。一方、オーロラキナーゼは細胞分裂の多くの過程に関与し癌組織でも観察されるため、オーロラキナーゼと腫瘍関連遺伝子、特にSXT/SSXとの関連を追及することが本研究の目的である。まずは骨肉腫、滑膜肉腫などの骨軟部腫瘍培養細胞のオーロラの過剰発現の検証、オーロラA、Bプロモーター部分を、滑膜肉腫細胞(Cell line Fuji)に導入した際のオーロラの相対的活性化度の検証を行い、オーロラの過剰発現を証明した。次いで線維芽細胞腫細胞(Cell line HT1080)にSYT/SSX+93(SYT部分が通常より+93の塩基配列を有する滑膜肉腫細胞)とSYT/SSX-93(通常の滑膜肉腫細胞)、SYT+93、SYT-93の4種類のプラスミドを用いてルシフェラーゼアッセイを行い、オーロラA、Bともに、すべてのプラスミドにおいて(特にSYT/SSX1+93が)有意な相対的活性上昇を認めた。またdeletion studyにおいて、オーロラA、Bプロモーターともに一定の場所で有意な活性低下を認め、そこに何らかの転写因子の結合部位があることが示唆された。さらにSYTSSX-93をもつ滑膜肉腫細胞(Fuji)に対してSiRNAを作成して導入したところ、STY/SSXの発現減少を認めた。一方、マウスに導入すべく、SYT/SSX+93をテトラサイクリンで発現コントロールが可能なベクター(pTREhyg2)に組み込んでプラスミドを作成している。

儿童经常看到恶性骨胎儿肿瘤，并且由于预后不良而进行的治疗研究仍然显着延迟。另一方面，由于Aurorakinase参与了许多细胞分裂过程，并且在癌症组织中观察到，因此本研究的目的是追求Aurorakinase与肿瘤相关基因，尤其是SXT/SSX之间的关系。首先，骨肿瘤培养的极光（例如骨肉瘤）和肉瘤肉瘤，当引入肉瘤细胞（细胞系Fuji）时，Aurora A和B启动子部分Aurora启动子。 aurora。接下来，SYT/SSX +93（细胞系HT1080）（具有+93 SYT部分+93的愚蠢膜细胞）和SYT/SSX-93（正常生殖器肉瘤细胞），使用四个荧光素酶测定在所有质粒中，发现质粒的类型，SYT+93和SYT-93，以及Aurora A和B的类型都具有重要的亲属（尤其是SYT/SSX1+93）。在删除研究中，在Aurora A和B启动子的某个位置发现了活性的显着降低，这表明存在某种转录因子的连接位点。此外，当用SYTSSX-93创建siRNA并将其引入膜肉瘤细胞（Fuji）时，观察到STY/SSX的表达。另一方面，为了将其引入小鼠，通过将SYT/SSX+93掺入载体（Ptrehyg2）中来产生质粒，该载体可以用TETRA循环控制表达。