マラリア媒介蚊の非媒介化に関する研究

疟疾媒介蚊非媒介化研究

• 批准号: 10166207
• 负责人: 小林 綾子
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10166207/
• 关键词: マラリア原虫; ハマダラ蚊; 昆虫生体防御

「マラリア媒介蚊の非媒介化」の実現に向けて、ハマダラ蚊の生体防御からの原虫の回避機構を明らかにすることを目的として昆虫の原虫に対する生体防御機構を解析した。今年度は、(1) 肝培養細胞へのマウスマラリア原虫スポロゾイト侵入系を確立した。原虫の侵入は培養3時間でも検出可能であった。原虫表面抗原に対する抗体で感染肝細胞数は抗体未処理に比べ1%〜5%へと顕著に減少した。原虫侵入細胞数は一回の実験でのばらつきはほとんどないが、用いる原虫感染蚊の感染後の日数や感染率に依存し、およそ百から数千の間で変動した。問題点(感染率の安定性、原虫を蚊体内より取り出す時間の制限などによる多サンプルを同時に扱う困難さ)はあるものの、今後この侵入系を用いて、目標とする昆虫由来物質の抗原虫活性を検索していくことが可能となった。(2) 新たな視点からの昆虫の異物認識機構の解明に向けて、変態期に見られる体液細胞の機能に着目した。変態期には不要な幼虫細胞が蛹化後の体液細胞により排除されるが、その分子機構は解明されていない。異物の認識・排除に関与する候補因子として、新たな蛹体液細胞膜表面抗原120蛋白を同定した。蛹の体液細胞は幼虫時に比べ貧食能が増大するが、この蛋白に対するモノクローナル抗体はこの増大する貧食活性を阻害した。抗体アフィニティカラムにより精製した120蛋白の部分アミノ酸配列の情報をもとにcDNA cloningを行った結果、この蛋白は細胞外にtandem EGF-like repeatsを有する構造的に新たな膜結合蛋白であることがわかった。今後、この因子を用い、昆虫の有する未知の不要細胞排除の分子機構を解析することが可能となった。

为了实现“传疟蚊不传播”，我们分析了昆虫对原虫的生物防御机制，旨在阐明原虫逃避按蚊生物防御的机制。今年，我们（1）建立了小鼠疟原虫子孢子侵入培养肝细胞的系统；即使在孵育 3 小时后也可检测到原生动物的入侵。与未用抗体处理的肝细胞相比，针对原生动物表面抗原的抗体将受感染的肝细胞数量显着减少至 1% 至 5%。在一次实验中，原生动物入侵的细胞数量变化不大，但根据所使用的感染原生动物的蚊子感染后的天数和感染率，从大约100个到数千个不等。虽然存在一些问题（由于感染率的稳定性，难以同时处理多个样本，从蚊子体内清除原虫的时间有限等），但我们将来会使用这个入侵系统来研究蚊子的抗原虫活性。现在可以搜索昆虫来源的目标物质。 (2)为了从新的角度阐明昆虫的异物识别机制，我们重点观察了变态过程中血淋巴细胞的功能。在变态过程中，不必要的幼虫细胞在化蛹后被血淋巴细胞清除，但其分子机制尚未阐明。我们鉴定出一种新的蛹液细胞膜表面抗原120蛋白作为参与识别和消除外来物质的候选因子。与幼虫阶段相比，蛹的血淋巴细胞具有增强的寡噬能力，并且针对该蛋白质的单克隆抗体抑制了这种增强的寡噬活性。根据使用抗体亲和柱纯化的 120 个蛋白质的部分氨基酸序列信息进行 cDNA 克隆，我们发现该蛋白质是一种结构新颖的膜结合蛋白，具有细胞外串联 EGF 样重复序列。未来将有可能利用这一因子来分析昆虫消除不必要细胞的未知分子机制。