細胞周期制御因子による心筋再生療法の開発を目指した研究

研究旨在利用细胞周期调节剂开发心肌再生疗法

基本信息

批准号：
19590806
负责人：
ADATI Mimi
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19590806/
关键词：
心筋再生サイクリンD1 核移行

项目摘要

哺乳類の心筋は生後終末分化すると増殖能を失う。哺乳類の心筋細胞がなぜ増えないのか解析する研究は、心筋細胞・神経細胞などの終末分化細胞の分化状態の維持機構の解明のみならず、未だ発展途上にある虚血性心疾患や特発性心筋症に対する心筋再生治療法の開発につながる可能性があり、重要性が高い。研究代表者はこれまでにラットを用いた実験で、細胞周期アクセル分子であるサイクリンD1が心筋の血清やGrowth刺激によって誘導されるものの核への局在が障害されており、実際には心筋の細胞周期は活性化されないことを見出し、サイクリンD1に核移行シグナル(NLS)を付加し強制的に核内に移行させることによってin vitro, in vivoにおいて心筋の細胞周期が廻ることを発見した。さらに、サイクリンD1の核局在障害の原因を、(1) 核内への移行、(2) 核内分解、(3) 核外移行の亢進、について解析したところ核内への移行が障害されていることが明らかになった。本研究ではサイクリンD1の核内移行障害の責任領域(アミノ酸範囲)を明らかにするために、複数の欠失変異または点変異を有するサイクリンD1の蛋白質とアデノウイルスベクターを作成し、in vitroおよびin vivo核移行アッセイを行った。その結果C-末のわずか10アミノ酸前後の配列がサイクリンD1の核内移行を抑制的に制御している可能性があることを見出した。心筋細胞の再生能とサイクリンD1の構造とを動物の進化段階に応じて比較すると、我々が同定した責任アミノ酸領域は、心筋再生能を有するフグやZebrafishなどの魚類やXenopusなどの両生類では見られず高等動物に進化するにつれて現れてくるということを見出している。また、サイクリンD2・D3にはみられない。この構造の違いがサイクリンD1の核移行阻害・心筋終末分化に伴う分裂停止に深く関わっていると考えられ、今後再生医療へ大きく発展する可能性がある。

结束时，哺乳动物的心肌肌肉失去了增殖能力。分析为什么哺乳动物心肌细胞的研究不仅增加，不仅阐明了终末分化细胞的维持机制，例如心肌噬菌体和神经细胞，而且仍会发展出缺血性心脏病和性心肌病。康复治疗非常重要。研究代表一直在使用大鼠，以至于由细胞加速器分子Cyclin D1诱导，这是由心肌血清和生长刺激诱导的，但实际上受细胞核的影响。被激活，发现心肌肌肉的细胞周期在体外增加了体外，通过将核过渡信号（NLS）添加到细胞周期蛋白D1并强行迁移到核武器中。此外，Cyclin D1的核电站障碍的原因，（1）向（1）向（1）向（1）向（1）向（1）的过渡，（2），（3）核转变的增加和过渡对核的细胞核受到了损害。在这项研究中，为了阐明循环D1的核迁移障碍（氨基酸范围）的责任面积（氨基酸范围），该蛋白质和腺病毒载体D1具有多个缺失或点可变的conscline d1。进行了体内核转移测定。结果，发现在C端结束时仅10个氨基酸的序列可能抑制了抑制性对照中细胞周期蛋白D1的核转变。比较心肌细胞的再生以及根据动物的进化，我们确定的责任是在鱼类和斑马鱼和其他两栖动物（例如Xenopus）中发现的责任。。同样，在细胞周期蛋白D2 / D3中找不到它。人们认为，这种结构的差异与骑自行车D1的核过渡和由于心脏末端的分裂深深涉及，并且将来可能会大大发展为再生医学。