好塩性細菌ハロモナスのセルフクローニング型アーミング細胞の開発と金属浄化への応用

嗜盐细菌Halomonas自克隆武装细胞的研制及其在金属提纯中的应用

基本信息

批准号：
18710064
负责人：
仲山英樹
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

好塩性細菌ハロモナス(Halomoaas elongata OUT30018株)は、優れた環境適応能力を持ち、重金属浄化技術のツールとして非常に有用である。本研究では、本学で独自に解読したハロモナスゲノム情報を基にハロモナス細胞表層工学を確立し、セルフクローニング型アーミングハロモナスの作製及び高塩環境水圏の効率的な浄化技術の開発を最終的な目的とし、特に平成19年度は以下の研究を行った。まず、平成18年度の研究成果により、ゲノム情報からハロモナス細胞表層工学のアンカータンパク質として選抜した外膜局在性リポタンパク質遺伝子について、ハロモナスを宿主としたプラスミド発現系を用いた解析を行った。そして、3%-18%NaClを添加した高塩環境下においてもハロモナス細胞表層工学のアンカーとして利用可能なリポタンパク質を選定した。さらに、プラスミド由来の外来遺伝子配列を保持せずに、アンカーと金属結合ドメインを融合した「金属浄化型アームタンパク質」を細胞表層に提示したセルフクローニング型アーミングハロモナスを作製するため、ゲノム上のリポタンパク質遺伝子部位の利用を検討した。ゲノム上のリポタンパク質遺伝子プロモーターの支配下にHAタグを付加したキメラ遺伝子を導入したハロモナスにおいても、プラスミド発現系を用いた場合と同等の発現量が得られたことから、目的遺伝子の導入部位としてリポタンパク質遺伝子部位が利用可能であると結論した。さらに、金属浄化型アーミングハロモナスにおける標的金属の蓄積量が顕著に上昇したことから、本研究成果の重金属浄化技術開発への応用が期待される。

Halomoaas Elongata Out30018应变，Halomoaas Elongata Out30018，具有出色的环境适应性，并且作为重金属纯化技术的工具非常有用。这项研究是基于我们大学独立地解密的Halomonas基因组信息建立的，最终的目标是创建自动策划的武装唱片，并为高盐环境水层开发有效的纯化技术。特别是在2007年进行了以下研究。首先，基于2006年的研究结果，使用以卤素化卤素为宿主为宿主的质粒表达系统分析了基因组信息的Halomonas细胞表面工程的锚固蛋白基因。即使在添加3％-18％NaCl的高盐环境中，也选择了可以用作唱片卤代细胞表面工程锚的脂蛋白。此外，为了产生自我抗管的武装卤素，这是一种“金属纯化的手臂蛋白”，它融合了锚固型和金属结合结构域，而无需保留源自质粒的外源基因序列，我们研究了基因组上脂蛋白基因位点的使用。在halomonas中，在基因组上添加了脂蛋白基因启动子的控制下添加了嵌合基因的嵌合基因，与获得质粒表达系统时相同的表达水平，得出的结论是，脂蛋白基因位点可以用作靶基因的位点。此外，靶金在金属纯净的武装唱片中的积累显着增加，并且预计这项研究将应用于重金属纯化技术的开发。