子宮体癌の予後に関与するフコシル化糖鎖の発現機構の解析 -フコース転移酵素の関与を中心に-

岩藻糖基化糖链参与子宫内膜癌预后的表达机制分析 - 重点关注岩藻糖基转移酶的参与 -

• 批准号: 07771402
• 负责人: 加藤 真也
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771402/
• 关键词: フコース転移酵素; Lewis^b型糖鎖; Le遺伝子

子宮体癌由来培養細胞株SNG-IIを免疫源として作製されたモノクローナル抗体MSN-1は組織化学的に正常子宮内膜とは殆ど反応しないのに対して子宮体癌組織とは高率に反応し、その組織反応性がよい症例ほど予後がよいことから、この抗体の認識抗原は子宮体癌の予後因子と密接に関係していると思われる。また、この抗体は少なくとも血液型関連糖鎖Lewis^bを認識することが判明している。そこでLewis^bの(Fuc α1-2 Gal β1-3 (Fuc α1-4) GlcNAc-)の構造のうちFuc α1-4という構造を構築するのに必須であるフコース転移酵素(FT-III)の遺伝子型と、MSN-1をはじめとする各種抗Lewis抗体の認識するフコシル化糖鎖の発現の有無との関連につき以下の実験を行った。1.子宮体癌摘出組織を用いてMSN-1による免疫染色を行うとともに、各患者の末梢血白血球より抽出したDNAを使ってPCR-RFLPの手法によりFT-III遺伝子(Le遺伝子)の遺伝子型を検索し、両者の関連を検討したところ、FT-IIIが不活性型であり、Lewis^b型糖鎖を発現するはずのない症例でもMSN-1反応陽性であった。2.そこで、各種Lewis型糖鎖に対する抗体を用いて子宮体癌組織50例を免疫染色したところ、MSN-1はLewis^b型糖鎖のほかにLewis^y型糖鎖も認識する可能性が示唆された。3.この結果からMSN-1は両者の糖鎖に共通する非還元未満の〔Fuc α1-2〕という構造を認識する可能性が出てきたため、この構造を特異的に切断する酵素(α1-2 Fucosidase)で子宮体癌組織を処理し、MSN-1対する反応性を免疫組織化学的に検討したところ、その反応性の低下がみられたため〔Fuc α1-2〕という構造の存在がMSN-1との反応に必要であることが示唆された。

使用子宫癌来源的培养细胞系SNG-II作为免疫原产生的单克隆抗体MSN-1在组织化学上几乎不与正常子宫内膜发生反应，但与子宫癌组织的反应率很高，但情况较好。组织反应性有较好的预后，该抗体识别的抗原被认为与子宫内膜癌的预后因素密切相关。此外，该抗体被发现至少能够识别与血型相关的糖链Lewis^b。因此，在Lewis^b(Fuc α1-2 Gal β1-3(Fuc α1-4) GlcNAc-)的结构中，构建Fuc α1-4结构所必需的岩藻糖基转移酶(FT-III)如下：进行实验以检查基因型与被包括MSN-1在内的各种抗路易斯抗体识别的岩藻糖基化糖链的表达存在或不存在之间的关系。 1.使用从子宫内膜癌取出的组织进行MSN-1免疫染色，并使用从每个患者的外周血白细胞中提取的DNA通过PCR-RFLP确定FT-III基因（Le基因）的基因型。 III并检查了两者之间的关系，我们发现FT-III是非活性类型，并且即使在不应该表达Lewis^b型糖链的情况下MSN-1反应也是阳性的。 2. 因此，当我们使用针对各种Lewis型糖链的抗体对50例子宫内膜癌组织进行免疫染色时，我们发现除了Lewis^b型糖链外，MSN-1还可以识别Lewis^y型糖链。 3. 从该结果来看，当子宫癌组织用 2 岩藻糖苷酶处理时，MSN-1 可能识别两个糖链共有的非还原性 [Fuc α1-2] 结构，并且与 MSN-1 的反应性降低。通过免疫组织化学检查，观察到反应性降低。表明结构[α1-2]的存在对于与MSN-1的反应是必要的。