マウス接触光過敏症における抑制性Th2細胞のT細胞受容体の解析

小鼠接触光敏性抑制性 Th2 细胞 T 细胞受体分析

• 批准号: 07770659
• 负责人: 八木 宏明
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07770659/
• 关键词: サプレッサーT細胞; Th_2; T細胞受容体

接触光過敏症(contact photosensitivity;CPS)は遅延型過敏症の一型であり、テトラクロロサリチルアニリド(TCSA)を光ハプテンとすることにより誘導可能である。このCPSは、光感作部皮膚に中波長紫外線(UVB)を前照射することによりCD4+の光ハプテン特異的サプレッサーT細胞(Ts)が誘導され感作成立が抑制される。我々は、Ts誘導マウス脾細胞をTCSA光修飾細胞で抗原刺激を行うことにより、99%がCD4+のフェノタイプを持ち、in vivoおよびin vitroにおいて抗原特異的な抑制活性を有し、高濃度にTsを含む細胞群(pulsed T cell;Tp)を精製し、またバイオアッセイをもちいて蛋白レベルでのサイトカイン産生パターンを調べたところTpが抗原刺激によりIL-4を産生し、また、TpよりmRNAを抽出しRT-PCR法により調べたところIL-4,IL-10のシグナルを認め、Th2としての性格を有することを示した。さらにTpのT細胞受容体(TCR)をマウスTCRVβに対する抗体を用いて調べたところVβ7とVβ13の2種類のクローンからなることがわかり一方の影響を除外したうえでin vitroにおいて調べたところVβ7を有するクローンに抑制活性があることがわかった。さらにこの抑制活性はIL-10に対する抗体を加えることで消失した。in vivoにおいてTs誘導マウス脾細胞を抗Vβ7抗体と補体で処理しナイーブマウスに投与したところ抑制活性が消失した。これらよりVβ7を有するT細胞が抑制活性を有しその活性はIL-10にある事を示し,このときTs投与マウスにおける惹起反応の抑制とリンパ節細胞内のVβ7陽性細胞数とに相関が見られた.またTpにおいてTh2タイプのサイトカイン産生を示すクローンはVβ7であることを確認した.

接触性光敏性（CPS）是一种迟发型超敏反应，可以通过使用四氯水杨酰苯胺（TCSA）作为光半抗原来诱导。在此 CPS 中，通过用中波长紫外线 (UVB) 预照射光敏皮肤，诱导 CD4+ 光半抗原特异性抑制 T 细胞 (Ts) 并抑制敏化。通过用TCSA光修饰细胞抗原刺激Ts诱导的小鼠脾细胞，我们发现其中99%具有CD4+表型，在体内和体外具有抗原特异性抑制活性，并且发现含有高度浓缩的Ts细胞群。 （脉冲 T当纯化Tp并使用生物测定法检查蛋白质水平的细胞因子产生模式时，发现Tp在抗原刺激下产生IL-4。经研究，我们发现IL-4和IL-10信号，表明它具有Th2。特征。此外，当使用针对小鼠TCRVβ的抗体对Tp的T细胞受体（TCR）进行研究时，发现它由Vβ7和Vβ13两种类型的克隆组成，并且发现具有该基因的克隆具有抑制活性。此外，通过添加抗 IL-10 抗体消除了这种抑制活性。在体内，当 Ts 诱导的小鼠脾细胞用抗 Vβ7 抗体和补体处理并给予初始小鼠时，抑制活性消失。这些结果表明，含有Vβ7的T细胞具有抑制活性，并且这种活性是由于IL-10所致，并且发现诱发反应的抑制与Ts处理的淋巴结细胞中Vβ7阳性细胞的数量之间存在相关性。我们还证实，Tp 中显示 Th2 型细胞因子产生的克隆是 Vβ7。