Development of targeted gene therapy to incurable sarcoma and malignant mesothelioma

开发针对无法治愈的肉瘤和恶性间皮瘤的靶向基因治疗

• 批准号: 18591651
• 负责人: YAMAMURA Hisako
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Research Institute, Osaka Medical Center for Cancer and Cardiovascular Disaeses
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18591651/
• 关键词: Sarcoma; Malignant mesothelioma; Herpes virus; Gene therapy; Hypoxia

We added 57 amino acids polypeptide within the ODD sequence of HIFlalpha, including proline residue at 564, to the amino terminal of HSV-1 ICP4 ptotein. Further, we added nuclear localization signal (NLS) comprising 23 amino acids to the amino terminus of ODD-ICP4.The CMV-NLS-ODD-ICP4-IRES-LacZ-polyA fragment was inserted into the Stu I site of pKpX2 (J. Virol.62,196-205,1988) (kindly provided by Dr. Weller in Coneticut University), and was linealized by digestion with XhoI. The resulting 11.3kb targeted recombination vector, UL39-CMV-NLS-ODD-ICP4-IRES-LacZ-polyA-UL39 was co-transfected with a mutant HSV-1 DNA, d120 into Vero cells (2.5x105cells/well). We isolated a single plaque of the recombinant HSV-1.The recombinant HSV-1 preferentially replicated in the hypoxic condition (O2 1%) and showed more potent anti-tumor activity. Expression of ICP4 was also enhanced in the hypoxic condition. The recombinant HSV-1 showed prominent anti-tumor activity against human malignant mesothelioma, leiomyosarcoma and breast cancer by direct injection into the tumors.

我们在HIFLALPHA的奇数序列中添加了57个氨基酸多肽，包括564的脯氨酸残基，在HSV-1 ICP4 ptotoin的氨基末端。此外，我们将包含23个氨基酸的核定位信号（NLS）添加到Odd-ICP4的氨基末端。CMV-NLS-ODD-IRD-IRES-LACZ-POLYA片段插入了PKPX2的Stu I位点（J. Virol.62，196-205，1988）（由Coneticut大学的Weller博士提供），并通过Xhoi的消化对线进行了线性。所得的11.3KB靶向重组载体，UL39-CMV-NLS-ODD-IRD-IRES-LACZ-POLYA-UL39与突变体HSV-1 DNA共转染了Vero细胞（2.5x105cells/ell）。我们分离了重组HSV-1的单个斑块。重组HSV-1优先复制在低氧条件下（O2 1％），并显示出更有效的抗肿瘤活性。在低氧条件下，ICP4的表达也得到了增强。重组HSV-1通过直接注射到肿瘤中，对人类恶性间皮瘤，平滑肌肉瘤和乳腺癌表现出明显的抗肿瘤活性。

项目成果

A novel variant of calponin-targeting oncolytic HSV-1 as a potent therapeutic agent for malignant mesothelioma

钙调蛋白靶向溶瘤 HSV-1 的新变体作为恶性间皮瘤的有效治疗剂

• 发表时间: 2007
• 作者: Hisako Yamamura;Katsuhito Takahashi
• 通讯作者: Katsuhito Takahashi

Robust CD133 expression and stem cell features of gastrointestinal stromal tumors (GIST)

胃肠道间质瘤 (GIST) 的强 CD133 表达和干细胞特征

• 发表时间: 2007
• 作者: Katsuhito Takahashi;Hisako Yamamura
• 通讯作者: Hisako Yamamura

ウイルス工学を応用したがん細胞標的医薬の開発 ; 肉腫・中皮腫・がん幹細胞の標的化

利用病毒工程开发针对肉瘤、间皮瘤和癌症干细胞的靶向药物；

• 发表时间: 2007
• 作者: 高橋克仁;山村倫子
• 通讯作者: 山村倫子

ウイルス工学を応用したがん細胞標的医薬の開発;肉腫・中皮腫・がん幹細胞の標的化

利用病毒工程开发针对肉瘤、间皮瘤和癌症干细胞的靶向药物；

• 发表时间: 2007
• 作者: 高橋克仁;山村倫子
• 通讯作者: 山村倫子

「研究成果報告書概要(和文)」より

摘自《研究结果报告摘要（日文）》

• 发表时间: 2005
• 作者: Kawauchi;et. al.;Nishimura et al.;Dezawa et al.;Yoshizawa et al.;星野 幹雄;星野 幹雄
• 通讯作者: 星野 幹雄