眼疾患に対する遺伝子・幹細胞治療-ヒト眼球幹細胞の可塑性と脱分化遺伝子Msk-

眼部疾病的基因/干细胞治疗 - 人眼干细胞的可塑性和去分化基因Msk -

基本信息

项目摘要

細胞治療用ヒト骨髄・月経血・臍帯血由来の間葉系細胞の調整とプロファイリング既に国立成育医療センター倫理委員会(承認番号25,26,27,49,55、全て平成15年)にて、承認を受けた骨髄・子宮内膜・臍帯血由来の間葉系細胞を単離、培養を行い、後の研究を進めるための蓄積をはかった。ならびに、分離培養したヒト間葉系細胞の性質を細胞表面マーカー、gene chip(Affymetrix)を用いたプロファイリングを行い細胞の有する性格を詳細に検討した。そのデータを利用して、これらの細胞が多分化能を有す状態を保つ培養条件、方法等を確立した。細胞治療用ヒト眼球由来の組織幹細胞の調整とプロファイリング既に国立成育医療センター倫理委員会(承認番号156)にて、承認を受けたヒト眼球由来の幹細胞を単離、培養を行い、後の研究を進めるための蓄積をはかった。ならびに、分離培養したヒト眼球幹細胞の性質を細胞表面マーカー、gene chip(Affymetrix)を用いたプロファイリングを行い細胞の有する性格を詳細に検討した。そのデータを利用して、これらの細胞が多分化能を有す状態を保つ培養条件、方法等を確立した。特に、神経あるいは網膜関連遺伝子発現を制御する因子(分化遺伝子、脱分化遺伝子の導入、液性因子)を解明した。また、Msx遺伝子を用いて、眼球由来幹細胞の特異性、他の組織に由来する幹細胞との違いを明確にするとともに、Msx familyの役割を明らかにした。モデルマウスを用いた検討ムコ多糖症モデルマウスの角膜にマウス正常細胞を移植し、中枢、網膜、角膜のムコ多糖沈着治療を行った。また、動物実験でマウスES細胞や間葉骨髄細胞に遺伝子を導入し、特異的な蛋白発現あるいは形態をもつ移植可能な細胞を作成した。
用于细胞治疗的人骨髓、经血和脐带血来源的间充质细胞的制备和分析。已获得国家儿童健康与发展中心伦理委员会批准(批准号25、26、27、49、55) ,均于 2003 年)分离、培养和积累来自骨髓、子宫内膜和脐带血的间充质细胞。此外,我们使用细胞表面标记和基因芯片(Affymetrix)对分离和培养的人间充质细胞的特性进行了分析,以详细检查细胞的特征。利用这些数据,我们建立了维持这些细胞处于多能状态的培养条件和方法。用于细胞治疗的人眼球来源组织干细胞的制备和分析 人眼球来源干细胞已获得国家儿童健康与发展中心伦理委员会批准(批准号156),分离、培养、并用于后续研究。此外,我们使用细胞表面标记和基因芯片(Affymetrix)对分离和培养的人眼干细胞的特性进行了分析,以详细检查细胞的特征。利用这些数据,我们建立了维持这些细胞处于多能状态的培养条件和方法。特别是,我们阐明了控制神经或视网膜相关基因表达的因素(分化基因、去分化基因的引入、体液因素)。此外,利用Msx基因,我们阐明了眼球来源的干细胞的特异性及其与其他组织来源的干细胞的差异,并阐明了Msx家族的作用。使用模型小鼠的研究将正常小鼠细胞移植到粘多糖沉积症模型小鼠的角膜中,治疗中央区域、视网膜和角膜的粘多糖沉积。此外,在动物实验中,我们将基因引入小鼠ES细胞和间充质骨髓细胞中,以创建具有特定蛋白质表达或形态的可移植细胞。

项目成果

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