骨髄内ニッチによる造血幹細胞制御機構の解明

髓内微环境阐明造血干细胞控制机制

基本信息

批准号：
07J02999
负责人：
細川健太郎
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J02999/
关键词：
細胞接着細胞分裂造血幹細胞ロッジング幹細胞制御

项目摘要

[研究成果と意義・重要性]本年度は、in vivoにおいて造血幹細胞(HSCs)の発現するN-cadを解析し、生理的条件下におけるN-cadを介した細胞接着が幹細胞の骨髄内局在等に与える影響を検討した。HSCsにおけるN-cadの発現を確認するため、FACS解析及び、単一細胞レベルでの定量的PCR解析を行ったところ、N-cadの発現はLT-HSCsで特に高いことが分かった。次に、このN-cad陽性HSCsにおける長期骨髄再構築能について連続移植法を用いて検討した。N-cad陽性HSCsを移植した群は陰性群と比較して有意に高い生着率を示し、2次移植以降もその生着率が維持されたことから、N-cadを発現するHSCsが長期骨髄再構築能を持つ幹細胞であることが考えられた。一方で逆説的にN-cadの機能を検討するため、N-cad特異的なshRNAプラスミドベクターを用いてHSCsにおけるN-cadの発現を抑制した。この発現抑制したHSCsを骨髄移植して骨髄再構築能の比較を行ったところ、生着率は著しく低下することが分かった。この再構築能の低下の原因としてホーミングの異常が考えられたが、骨髄/肺臓へのホーミング自体に異常はなかった。しかし、骨近傍ニッチへの局在(ロッジング)を比較すると、N-cad発現抑制群においては有意にこれが少ないことが分かった。このことから幹細胞による骨髄再構築能を発揮するためには、骨近傍ニッチへのロッジングにN-cadが重要な役割を持つことが考えられた。本研究の成果は、骨髄内ニッチとHSCsとのN-cadを介した細胞接着により静止状態を制御する機構を明らかにするための手掛かりとなりうる。また本研究の知見から、in vivoにおけるN-cadの役割がニッチへのロッジングに特化していることが窺え、成体における幹細胞の接着や分裂に対する知見をさらに掘り下げたという点で、非常に意義深いと考えられる。

[研究结果，意义和重要性]今年，我们分析了体内表达造血干细胞（HSC）的N-CAD，并检查了生理条件下N-CAD介导的细胞粘附对干细胞内生成的影响，以证实N-CAD在HSS的表达，并确认了N-CAD的表达，并且在HHSCS中表达了较高的PCR分析，并在iTit ccr分析中表现出了一级分析。 LT-HSC。接下来，使用连续植入方法研究了这些N-CAD阳性HSC中的长期骨髓重建能力。与阴性组相比，用N-CAD阳性HSC移植的组显示出植入率明显更高，并且在次级植入后的植入率仍然保持植入率，这使得表达N-CAD的HSC是具有长期骨髓重建能力的干细胞。另一方面，为了矛盾地检查N-CAD的功能，使用N-CAD特异性shRNA质粒载体抑制了HSC中N-CAD的表达。当将这些抑制的HSC表达移植并比较骨髓重建能力时，发现植入率显着降低。重建能力降低的原因被认为是由异常归巢引起的，但是骨髓/肺器官的归宿中没有异常。但是，当将定位（住所）与近骨壁righe进行比较时，发现在抑制N-CAD表达的组中，这明显较小。这表明N-CAD在将骨骼构成骨骼的壁ni中起着重要作用，以便通过干细胞发挥骨髓重建能力。这项研究的结果可以提供线索，以阐明通过N-CAD介导的细胞粘附和HSC之间的N-CAD介导的细胞粘附来调节静态状态的线索。此外，这项研究的发现表明，N-CAD在体内的作用专门用于构成壁ni，它被认为非常有意义，因为它进一步探讨了成人干细胞粘附和分裂的知识。