口腔癌の放射線感受性におけるDNA修復とテロメラーゼの関係

DNA修复与端粒酶在口腔癌放射敏感性中的关系

• 批准号: 18791388
• 负责人: 亀田 綾子
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The Nippon Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791388/
• 关键词: 悪性腫瘍細胞; 放射線感受性; テロメア長; テロメラーゼ; DNA修復; 口腔癌

細胞はヒト舌由来squamous cell carcinoma cell line (SCC-9, SCC-25),ヒト咽頭由来squamous cell carcinoma cell line (FaDu),ヒト顎下腺由来epidermoid carcinoma cell line (A-253),ヒト皮膚由来malignant melanoma cell line (G-361),正常ヒト新生児包皮由来keratinocyte (NHEK (F))を使用した。各細胞のテロメラーゼ活性,テロメア長を測定し,放射線照射後の細胞生存率を比較した。RT-PCRにて各細胞におけるテロメラーゼ逆転写酵素(hTERT),テロメア結合タンパク(TRF2),テロメア維持安定化に関与するといわれるKu70,NBS1のmRNA発現を調べた。またプラスミドDNAを用いたDNA二本鎖切断修復を調べた。各細胞のテロメア長は,NHEK:12.3kb,SCC-9:2.3kb,SCC-25:2.1kb,FaDu:6.5kb,A-253:13.8kb,G-361:5.3kbで,照射後の細胞生存率の低いSCC-9,SCC-25でテロメアが短かく,テロメラーゼ活性も低かった。。RT-PCRの結果,hTERT,Ku70は照射後生存率の低いSCC-9,SCC-25で発現が低かった。TRF2はA-253,G-361でやや低い傾向がみられた。NBS-1の発現に大きな差はみられなかったが、SCC-25でやや発現が低かった。全ての細胞でDNA二本鎖切断修復を認めた。今回の検討の結果,悪性腫瘍細胞の放射線感受性はテロメラーゼ活性やテロメア長と関連しており,hTERTやKuの関与が示唆された。DNA二本鎖切断修復能力は全ての細胞で認められたが,今後は修復のaccuracyの検討が必要である。

细胞是鳞状细胞癌细胞系（SCC-9，SCC-25），鳞状细胞癌细胞系（FADU），表皮样癌细胞系（A-253），恶性黑色素瘤细胞系（G-361）和角质细胞（NHEK（NHEK（f）），来自正常人Neanat forsek forse forsion forse forse。测量每个细胞的端粒酶活性和端粒长度，并比较辐射后的细胞活力。 RT-PCR研究了端粒酶逆转录酶（HTERT），端粒结合蛋白（TRF2），KU70和NBS1的mRNA表达，据说与端粒维持和稳定相关的mRNA表达。另外，研究了使用质粒DNA的DNA双链断裂修复。每个细胞的端粒长度为NHEK：12.3KB，SCC-9：2.3KB，SCC-25：2.1KB，FADU：6.5KB，A-253：13.8KB，G-361：5.3KB，以及SCC-9和SCC-9和SCC-25，其在触发后的细胞纤维活性低，并且远距离触发性低。 。 RT-PCR显示HTERT和KU70在SCC-9和SCC-25中表达较低，SCC-9和SCC-25辐射后的存活率较低。在A-253和G-361中，TRF2趋于略低。 NBS-1的表达没有显着差异，但是SCC-25的表达略低。在所有细胞中都观察到DNA双链断裂修复。本研究表明，恶性肿瘤细胞的辐射敏感性与端粒酶活性和端粒长度有关，这表明HTERT和KU的参与。在所有细胞中都观察到了修复DNA双链断裂的能力，但是有必要研究将来修复的准确性。

项目成果

悪性腫瘍細胞におけるテロメラーゼ発現と放射線の影響

恶性肿瘤细胞中端粒酶的表达及辐射的影响

• 发表时间: 2007
• 作者: 山田 篤;他;亀田綾子
• 通讯作者: 亀田綾子