骨芽細胞におけるPKRを介したアポトーシス誘導機序の解明

阐明 PKR 介导的成骨细胞凋亡诱导机制

基本信息

批准号：
18791353
负责人：
森本景之
金额：
$ 2.24万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791353/
关键词：
PKR 骨芽細胞アポトーシス NFκB リン酸化オカダ酸

项目摘要

本研究の目的はオカダ酸誘導アポトーシスにおけるPKRとNF-κBとIκBの役割を明らかとする事である。オカダ酸誘導アポトーシスの機序についてNF-κBとIκBリン酸化の点より検討を加え、ヒト骨芽細胞にキナーゼ不活型変異PKRを遺伝子導入し、骨芽細胞のオカダ酸やLPS等によるアポトーシス誘導に変化が生じるか調べた。1.骨芽細胞をオカダ酸により処理するとNF-κB転写活性が上昇し、NF-κBとIκBがリン酸化されそのリン酸化部位はNF-KBの536番目セリン残基とIκBのチロシン残基であることを明らかとした。これらの結果の一部はJ Cell Biochem誌およびMole Cell Biochem誌に発表し、残りの結果については現在論文投稿中である。2.PKR変異骨芽細胞を樹立した。変異細胞ではオカダ酸によるIκBのリン酸化残基が異なること、LPSや細菌抽出物によるアポトーシス誘導が異なることを明らかとした。また線維芽細胞においてLPS処理によりPTENの発現やAktのリン酸化が変化することも明らかとした。これら結果ついてはMole Cell Biochem誌に発表し、Cell Biol Int誌において現在印刷中である。また残りの結果については現在論文準備中である。3.細胞周期を停止させるとPP1の発現量が変化し、核小体形態や核内蛋白にも変化が生じることを明らかとし、Cell Biochem Funct誌において現在印刷中である。以上に示すように、現在までにNF-κB、IκBとアポトーシスとの相互関係を明らかとし、リン酸化調節を受ける部位についても明らかとする結果を得ている。また、PKR変異細胞におけるアポトーシス誘導機序の違いやLPSによる影響等についても明らかとした。こうした事より骨芽細胞においてアポトーシスの進行にNF-κBとIκBのリン酸化やPKRが深く関わっている事を解明する事が出来た。

本研究的目的是阐明PKR、NF-κB和IκB在冈田酸诱导的细胞凋亡中的作用。我们从NF-κB和IκB磷酸化的角度研究了大田酸诱导细胞凋亡的机制，将激酶失活的突变体PKR引入人成骨细胞中，并通过大田酸、LPS等诱导成骨细胞凋亡。任何变化1.当成骨细胞用冈田酸处理时，NF-κB转录活性增加，并且NF-κB和IκB被磷酸化。磷酸化位点是NF-KB的第536位丝氨酸残基和IκB的酪氨酸残基。其中部分结果已发表在《J Cell Biochem》和《Mole Cell Biochem》上，其余结果目前正在提交中。 2.建立PKR突变型成骨细胞。我们发现突变细胞中大田酸对IκB的磷酸化残基不同，LPS和细菌提取物对细胞凋亡的诱导也不同。我们还发现 LPS 处理会改变成纤维细胞中的 PTEN 表达和 Akt 磷酸化。这些结果发表在《Mole Cell Biochem》杂志上，目前正在《Cell Biol Int》杂志上印刷。我们目前正在准备一篇关于剩余结果的论文。 3.我们发现当细胞周期停滞时，PP1的表达水平发生变化，核仁形态和核蛋白也发生变化。这项研究目前发表在《Cell Biochem Funct》杂志上。如上所示，迄今为止，我们已经获得了阐明NF-κB、IκB与细胞凋亡之间的相互关系以及磷酸化调节的位点的结果。我们还阐明了PKR突变细胞中凋亡诱导机制的差异以及LPS的影响。这些结果表明NF-κB和IκB磷酸化和PKR深度参与成骨细胞凋亡的进程。