肺塞栓症における新しい診断マーカーの開発

肺栓塞新诊断标志物的开发

基本信息

批准号：
18791096
负责人：
影山京子
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

われわれは.人工膝関節置換術(TKA)を施行する患者に於いてターニケット使用群,非使用群にわけて血小板及び白血球の活性化,凝集反応の違いの検討を行ってきた。検体はとう骨動脈から動脈血採血及びIVHカテーテルから下大静脈血採血を行い。採血時期は術前,術中(ターニケット使用中),術直後(ターニケッット解除後),術後8時間,24時間行った。in vitro下でアゴニストにより凝集反応を惹起,全血血小板凝集装置を用いて凝集能の経時的変化を見た。その結果,どちらも静脈血側において術後凝集反応促進をみとめ,特にターニケット使用群において術後強い凝集促進を示した。さらに血小板が活性化されたときにおこる血小板放出反応を調べるためにELISA法を用いてβ-トロンボグロブリン(β-TG)や,Platelet factor4(PF4),可溶性CD40Lもあわせて調べたが,これらの値も静脈血側において術後有意に上昇を認め,PF4と可溶性CD40Lはターニケット非使用群に比べ使用群において有意に上昇を認めた。術中ターニケット使用群において動脈側より中心静脈側で血小板及び白血球の活性化の上昇,凝集反応促進がおきていれば,肺循環において凝集塊がトラップされたということを意味し,血栓形成および肺塞栓の発症の可能性を示唆する。われわれはさらに肺梗塞の原因となる好中球血小板凝集塊(Leucocyte-Platelet Conjugate)は白血球と血小板のクロストークによりお互いが活性化され生じる事を証明するためにTKA手術においてターニケット使用による血小板活性及び白血球活性の上昇及びLeucocyte-Platelet Conjugateの上昇を証明した。フローサイトメトリ法を用いてLeucocyte-Platelet Conjugate上の血小板活性を示す細胞(CD14^+CD62P^+cell,CD14^+CD154^+cell),単球活性を示す細胞(CD14^+CD116^+cell,CD14^+CD142^+cell)それぞれについて測定を行い,好中球よりも単球上における有意な活性化を認めた。

我们研究了接受全膝关节置换术（TKA）的患者在使用和不使用止血带的情况下血小板和白细胞活化和凝集反应的差异。标本是从桡动脉抽取的动脉血和从IVH导管抽取的下腔静脉血。在去除止血带之前、期间和之后立即以及手术后8小时和24小时收集血液。在体外用激动剂诱导凝集反应，并使用全血血小板聚集装置观察聚集能力随时间的变化。其结果，均在静脉血侧观察到术后聚集促进，特别是在止血带组中观察到强烈的术后聚集促进。此外，为了研究血小板被激活时发生的血小板释放反应，我们还使用ELISA方法研究了β-血栓球蛋白（β-TG）、血小板因子4（PF4）和可溶性CD40L也有显着增加。术后静脉血值中，与非止血带组相比，止血带组的PF4和可溶性CD40L显着升高。在术中止血带组中，如果血小板和白细胞的活化和聚集反应在中心静脉侧而不是动脉侧增加，则意味着聚集物被困在肺循环中，从而可能导致血栓形成和肺栓塞的可能性。我们进一步研究了TKA手术期间使用止血带激活血小板，以证明引起肺梗塞的中性粒细胞-血小板缀合物是由白细胞和血小板之间的串扰引起的，它们相互激活白细胞活性和白细胞-血小板。证明了共轭。使用流式细胞术方法在白细胞-血小板缀合物上显示血小板活性的细胞（CD14^+CD62P^+细胞、CD14^+CD154^+细胞）、显示单核细胞活性的细胞（CD14^+CD116^+细胞）、CD14^+CD142^ +细胞）进行了测量，并且在单核细胞上观察到比在中性粒细胞上显着的激活。