乳癌細胞の肺転移能を亢進させる遺伝子FOXC2とその臨床細胞病理学的研究

增强乳腺癌细胞肺部转移能力的基因FOXC2及其临床细胞病理学研究

基本信息

批准号：
18790990
负责人：
CHANDRA Abhishek
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

マウス乳癌EpRas細胞にFoxc2発現ベクターを遺伝子導入し高発現永久株を樹立した。親株のEpRas細胞やFoxc2高発現株細胞をマウス乳腺皮下の脂肪組織に移植した。そして、約6週後に原発巣および肺転移の癌を検討した。原発巣の腫瘍サイズや数は親株と高発現株の間に差はなかった。しかし、肺への転移巣の数は親株を移植した場合10個であるのに対し、Foxc2高発現株では40個と4倍になっていた。また、転移巣の癌細胞はFoxc2高発現が持続していた。転移亢進とFoxc2遺伝子発現との関係を今年度は検討した。まず、Foxc2高発現細胞では、TGFβが高値を示すことが明らかになった。次に、上皮-間葉転換をおこすTwist高発現細胞、Snail高発現細胞、そして癌遺伝子Ras高発現細胞におけるFoxc_2遺伝子の発現レベルを検討したところ、Ras、Twist、Snail高発現細胞では、Foxc_2mRNAが増加していることが明らかになった。また、昨年度から行ってきた、癌細胞の浸潤メカニズムについては、Boydenチャンバーを用いて、FoxC_2高発現細胞は膜面を通過できる細胞数が増加し、逆にsiRNAで内因性にFoxC_2発現の高い乳癌細胞のFOXC_2mRNAをノックダウンすると、膜面を通過できる細胞数が減少した。また、上皮細胞が周りの間質に侵入する時にはメタロプロテアーゼが重要な役割を果たすことが知られているが、Foxc_2高発現細胞では、MMP-2やMMP-9の活性が増加していることも明らかになった。以上のデータは、乳癌細胞にFOXC_2遺伝子が高発現すると、上皮細胞の性質から間葉細胞の性格に変身して、運動性や浸潤性を獲得し、転移能が亢進したと考えられる。

我们将Foxc2表达载体导入小鼠乳腺癌EpRas细胞中，并建立了高表达的永久细胞系。将亲本株EpRas细胞和Foxc2高表达细胞移植到小鼠乳腺皮下脂肪组织中。大约6周后，检查原发肿瘤和肺转移。亲本株和高表达株之间原发肿瘤的大小或数量没有差异。然而，与亲本菌株移植时的10个相比，肺部转移灶的数量增加了4倍，而在Foxc2高表达菌株中为40个。此外，转移灶中的癌细胞继续具有高 Foxc2 表达。今年，我们研究了转移增加与 Foxc2 基因表达之间的关系。首先，研究表明 Foxc2 高表达的细胞表现出高水平的 TGFβ。接下来，我们研究了高表达Twist的细胞、高表达Snail的细胞和高表达癌基因Ras的细胞中经历上皮间质转化的Foxc_2基因的表达水平，发现Foxc_2 mRNA变成了很明显，这个数字正在增加。另外，关于我们从去年开始使用Boyden小室进行的癌细胞的侵袭机制，我们发现FoxC_2表达高的细胞可以通过膜表面的细胞数量增加，反之，FoxC_2表达高的细胞可以通过膜表面的细胞数量增加。 siRNA，具有高内源性表达 FoxC_2 的乳腺癌细胞敲除细胞中的 FOXC_2 mRNA 会减少可以穿过细胞膜表面的细胞数量。此外，已知金属蛋白酶在上皮细胞侵入周围基质时发挥重要作用，并且还揭示了高表达Foxc_2的细胞中MMP-2和MMP-9的活性增加。上述数据表明，当乳腺癌细胞表达高水平的FOXC_2基因时，它们从上皮细胞特征转变为间质细胞特征，获得运动性和侵袭性，并增强转移潜力。