EBUS-TBNAによる生検組織を用いた低侵襲肺がん診断システムの構築

利用EBUS-TBNA构建活检组织微创肺癌诊断系统

基本信息

批准号：
18790986
负责人：
中島崇裕
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Chiba University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

研究実施計画に基づき、以下の研究を行った。(1)EBUS-TBNA検体を用いた遺伝子変異解析として、EGFR遺伝子変異についての解析を行った。EGFR exon19,20,12を対象に遺伝子変異解析を行い、EBUS-TBNA検体を用いたEGFR遺伝子変異解析が可能であるとともに、変異を有する症例ではGefitinibに対し高い感受性を示すことを、国際学会にて報告した(IASLCおよびChest)。また、欧米等ではEGFR遺伝子の増幅異常とチロシンキナーゼ阻害薬の感受性について報告も多く、CISH法による遺伝子増幅の検出を試み、遺伝子変異とは独立して異常増幅が見られることを確認した。チロシンキナーゼ阻害薬使用における重要なバイオマーカーとなりうる可能性があり、今後解析数を増やし、報告を行う予定である。(2)EBUS-TBNA検体を用いた、DNA異常メチル化解析を行った。これによりEBUS-TBNA検体においてもメチル化の検出が可能であり、さらにメチル化頻度が高い症例において、シスプラチンを含んだ化学療法に対し、高感受性であることを示し、国際学会および国内学会にて報告した(ATS、日本肺癌学会総会)。EBUS-TBNA検体を用いた遺伝子解析が、肺癌治療におけるバイオマーカーとなりうることを示した。(3)EBUS-TBNA検体から、マイクロダイセクション法を用いて腫瘍細胞を取り出し、ここからRNAを抽出し、EBUS-TBNA検体における5-FU代謝関連遺伝子の発現について検討した。この結果、転移を有するリンパ節組織での腫瘍細胞は、母集団平均と比較してDNA合成に関する遺伝子発現が高い傾向にあり、予後と関連する可能性が示唆された。これは抗癌剤選択におけるバイオマーカーのみならず、予後予測因子としても有用である。この成果は、2008年の呼吸器内視鐘学会総会にて発表予定である。

根据研究实施方案，开展了以下研究。 (1)作为使用EBUS-TBNA标本的基因突变分析，我们进行了EGFR基因突变分析。我们针对EGFR外显子19、20和12进行了基因突变分析，并在国际学术会议上宣布可以使用EBUS-TBNA标本进行EGFR基因突变分析，并且突变病例对吉非替尼（IASLC和Chest）高度敏感。）。此外，欧洲和美国也有很多关于EGFR基因异常扩增和对酪氨酸激酶抑制剂敏感性的报道。我们尝试使用CISH方法检测基因扩增，并证实观察到异常扩增与基因突变无关。它有潜力成为酪氨酸激酶抑制剂使用的重要生物标志物，我们计划在未来增加对其进行分析和报告的数量。 (2)利用EBUS-TBNA标本进行DNA异常甲基化分析。结果，即使在EBUS-TBNA样本中也可以检测到甲基化，并且已经表明甲基化频率高的病例对含有顺铂的化疗高度敏感（ATS，日本肺癌协会大会）。我们证明，使用 EBUS-TBNA 标本进行遗传分析可以作为肺癌治疗的生物标志物。 (3)采用显微切割技术从EBUS-TBNA标本中去除肿瘤细胞，提取RNA，并检测EBUS-TBNA标本中5-FU代谢相关基因的表达情况。结果显示，与群体平均水平相比，转移淋巴结组织中的肿瘤细胞往往具有更高的DNA合成相关基因表达，这表明这可能与预后有关。这不仅可用作抗癌药物选择的生物标志物，还可用作预后预测因子。这些结果计划在 2008 年呼吸内窥镜学会大会上公布。