ウイルムス腫瘍における細胞周期制御遺伝子のエピジェネティック異常

肾母细胞瘤细胞周期控制基因的表观遗传异常

• 批准号: 18790745
• 负责人: 春田 雅之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Research Institute for Clinical Oncology, Saitama Cancer Center
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790745/
• 关键词: Wilms腫瘍; 染色体異数性; 細胞周期制御遺伝子; エピジェネティックス; DNAメチル化; 癌

腫瘍組織ではがん抑制遺伝子の異常は欠失や塩基変異のみならず,プロモーターのメチル化などのエピジェネティックな変化による発現抑制が多くの遺伝子で生じることが知られている.特に癌細胞増殖と深く関わる細胞周期チェックポイント遺伝子群には変異がまれであることから,エピジェネティック異常による発現抑制が細胞周期異常および腫瘍形成に関与すると考えられる.そこで,本研究においては高2倍性核型を示すWilms腫瘍とスピンドルチェックポイント遺伝子群(MAD1L1,MAD2L1,BUB1,BUB3,BUBR1)やM期制御遺伝子であるRASSF1Aの発現異常に焦点を当て研究を進めた。また、高2倍性核型を示すWilms腫瘍の分子生物学的特徴を明らかにすることを試みた.Real-time PCRによるMAD1L1,MAD2L1,BUB1,BUB3,BUBR1のmRNAの発現解析においてすべてのWilms腫瘍で正常腎と比して明らかに発現量が上昇しており,高2倍性核型と2倍性Wilms腫瘍でこれらの遺伝子について発現量に有意な差は認められなかった.しかし,BUBR1の蛋白発現レベルをwestern blotting法により解析したところ正常腎3例では発現がなく,2倍性Wilms腫瘍5例中4例で発現を認め,高2倍性腫瘍では7例中6例に発現を認めなかった.一方,RASSF1AのMSP解析では,高2倍性腫瘍17例中13例でメチル化PCR産物のみを認めたが2倍性腫瘍7例では非メチル化PCR産物または部分メチル化PCR産物を認め,また,半定量PCRにおいて発現とメチル化の相関を認めた.これらの所見より、Wilms腫瘍において細胞周期制御遺伝子BUBR1蛋白量低下およびRASSF1AのDNAメチル化によるエピジェネティックな発現抑制により染色体異数性が生じている可能性が示唆された.

众所周知，肿瘤抑制基因的异常不仅会导致缺失和碱突变，而且还会导致许多由于表观遗传变化（例如启动子甲基化）抑制表达的基因。特别是，在细胞周期检查点基因组中很少见，该基因与癌细胞增殖深深相关，因此人们认为由于表观遗传异常引起的表达抑制与细胞周期异常和肿瘤形成有关。因此，在这项研究中，我们专注于表现出高二倍体核型和纺锤体检查点基因组（MAD1L1，MAD2L1，BUB1，BUB3，BUBR1）和RASSF1A异常表达的Wilms肿瘤。我们还试图阐明具有高二倍体核型的Wilms肿瘤的分子生物学特征。在对实时PCR的MAD1L1，MAD2L1，BUB1，BUB3和BUBR1的mRNA表达的分析中，与正常肾脏相比，所有Wilms肿瘤中的表达水平明显升高，并且在高二倍体Karyotypes和Diploid Wilms thamors中，这些基因的表达水平没有显着差异。但是，BUBR1的蛋白表达水平被西化。通过印迹法分析显示，在3例正常肾脏病例中没有表达，其中4例2倍Wilms肿瘤中有4例，其中7例高倍Wilms肿瘤中有6例。另一方面，RASSF1A MSP分析表明，在17例高折Wilms肿瘤中，只有13例甲基化的PCR产物仅发现甲基化的PCR产物，但是7例2倍的肿瘤表现出未甲基化的PCR产物或部分甲基化的PCR产物，并且在半等电性PCR中观察到表达和甲基化之间的相关性。这些发现表明，可能是由于细胞周期控制的基因BUBR1蛋白含量和RASSF1A DNA甲基化的表观遗传抑制而可能发生的染色体非整倍性。

项目成果

Promoter hypermethylation of the RASSFLA gene predicts the poor outcome of patients with hepatomlastoma

RASSFLA 基因启动子高甲基化可预测肝母细胞瘤患者的不良预后

• 发表时间: 2006
• 期刊: Pediatric Blood ＆ Cancer (in press)
• 作者: Sugawara W;Haruta M;et al.
• 通讯作者: et al.

Down-regulation of BubR1 protein expression and promoter hypermethylationof RASSF1A in Wilms tumors with diverse cytogenetic changes.

在具有多种细胞遗传学变化的肾母细胞瘤中，BubR1 蛋白表达下调和 RASSF1A 启动子高甲基化。

• 期刊: Molecular Carcinogenesis In press.
• 作者: Haruta M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Assosiation of 11q loss, trisomy 12 and possible 16q loss with loss of imprinting of insulin-like growth gactor-II in wilms tumor

维尔姆斯瘤中 11q 缺失、12 三体和可能的 16q 缺失与胰岛素样生长因子-II 印记缺失的关联

• 发表时间: 2006
• 期刊: Genes Chromosomes Cancer 45
• 作者: Watanabe N;Nakadate H;Haruta M;et al.
• 通讯作者: et al.

Loss of imprinting (LOI) of IGF2was found in a substantial number of Wilms tumors in Japanese children.

在日本儿童的大量肾母细胞瘤中发现了 IGF2 印迹丢失 (LOI)。

• 发表时间: 2007
• 作者: Haruta M;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Duplication of the paternal IGF2 allele in trisomy 11 and elevated expression levels of IGF2 mRNA in congenitat mesoblastic nephroma of the cellular ormixed type.

细胞型或混合型先天性中胚层肾瘤中 11 三体中父系 IGF2 等位基因的重复以及 IGF2 mRNA 表达水平升高。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Genes Chromosomes Cancer 46
• 作者: Watanabe N;Haruta M;et. al.
• 通讯作者: et. al.