白血病関連遺伝子産物のPMLアセチル化の意義

白血病相关基因产物PML乙酰化的意义

基本信息

批准号：
18790649
负责人：
早川文彦
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究の目的はPML機能のアセチル化による調節の機構解明、及びアセチル化を介したPML機能増強によるAPL細胞のアポトーシス誘導にある。我々はこれまでに試験管内でPMLがヒストンアセチル化酵素であるp300、GCN5によりアセチル化される事を証明しそのアセチル化部位を同定した。細胞内でもPMLがアセチル化されており、それは既知のヒストン脱アセチル化酵素阻害剤であるトリコスタチンA(TSA)の刺激により増強される事も見いだした。更に細胞内ではPMLのアセチル化がPMLのSUM0化を増強する事を発見した。PMLをsiRNAによりノックダウンしたHeLa細胞、あるいはPMLノックアウトマウスより作製したMEF細胞を用いる事により、PMLアセチル化により誘導されるPML SIM0化がTSAによる腫瘍細胞のアポトーシスのメガニズムとして重要である事が示された。我々の成果は腫瘍抑制因子PMLの新規翻訳後修飾としてアセチル化を見いだす事によりその機能調節に対する理解を深めると供に、有用な抗がん剤候補と考えられながらその作用機序の多くが不明であるヒストン脱アセチル化酵素阻害剤の作用機序の一部を解明する事に繋がるものである。これらは学会発表されると供に論文にまとめられ現在海外雑誌に投稿中である。またPMLの細胞増殖への関与を調べる過程で、PMLと協調してAPLの発症に関与していると考えられているFLT3重複縦列変異(FLT3/ITD)のシグナル伝達とFLT3シグナル阻害剤による増殖抑制効果についても検討する必要が生じこれを行った。こちらは他の研究データとあわせて学会で報告し、論文として出版し、特許を申請した。

本研究的目的是阐明乙酰化调节PML功能的机制，并通过乙酰化增强PML功能来诱导APL细胞凋亡。我们之前已经在体外证明了 PML 被组蛋白乙酰转移酶 p300 和 GCN5 乙酰化，并鉴定了乙酰化位点。我们还发现 PML 在细胞内乙酰化，通过曲古抑菌素 A (TSA)（一种已知的组蛋白脱乙酰酶抑制剂）的刺激可增强这种乙酰化。此外，我们发现 PML 的乙酰化增强了细胞内 PML SUM0 的形成。通过使用用 siRNA 敲除 PML 的 HeLa 细胞或从 PML 敲除小鼠产生的 MEF 细胞，我们证明了 PML 乙酰化诱导的 PML SIM0 转换作为 TSA 诱导的肿瘤细胞凋亡的重要机制。通过发现乙酰化作为肿瘤抑制因子 PML 的一种新型翻译后修饰，我们的研究结果加深了我们对其功能调节的理解。尽管它被认为是一种有用的抗癌药物候选物，但其许多作用机制仍然未知。阐明组蛋白脱乙酰酶抑制剂的部分作用机制。这些成果已在学术会议上发表，并汇编成论文，目前正在向海外期刊投稿。此外，在研究PML参与细胞增殖的过程中，我们研究了FLT3重复串联突变（FLT3/ITD）的信号转导，该信号被认为与PML协同参与APL的发展以及细胞增殖。 FLT3信号抑制剂还需要检查抑制效果，所以就这样做了。我们在学术会议上将其与其他研究数据一起报告，以论文形式发表，并申请了专利。