蛍光相関分光法によるMHCクラスII提示抗原の同定法の確立

荧光相关光谱鉴定MHC II类呈递抗原方法的建立

基本信息

批准号：
18770106
负责人：
宮寺浩子
金额：
$ 2.37万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770106/
关键词：
免疫学

项目摘要

本研究は、睡眠疾患であるナルコレプシーとの関連が非常に高い、HLAクラスIIアリルの結合特異性を明らかにすることを目的として行った。ナルコレプシーの主要な遺伝的要因はHLAクラスIIであり、日本人患者群の100%がDNA配列レベルで同一のアリル(DQB1*0602)を有する。この知見は、ナルコレプシー発症にHLAクラスIIを主体とする自己免疫反応が関与することを強く示唆するが、その機構は未解明である。本研究では、ナルコレプシー発症にHLAクラスIIが関与する機構を明らかにするために、DQB1*0602が特異的に結合する自己抗原ペプチドの同定を行うことを目的として行った。そのために、まず、遺伝学的研究から明らかにされている疾患抵抗性HLAアリルの機能に着目した。具体的には、疾患感受性アリルDQB1*0602とヘテロで保持する場合に疾患抵抗性アリルとして機能することが推測されているDQB1*0501、*0601アリルの役割を明らかにし、また他のHLA-DQアリルをトランスで保持する場合の疾患感受性への影響を明らかにする目的で、主要なHLA-DQアリルのαβサブユニット間での二量体形成能を昆虫細胞発現系、および哺乳類繊維芽培養細胞、B細胞系培養細胞を用いて解析した。その結果、抵抗性アリルとして同定されているDQBアリルの疾患抵抗性は、このアリルと連鎖不平衡にあるDQAアリルの影響を受けている可能性が示唆され、これらの結果は現在投稿準備中である。また、これらの二量体形成パターンに関与する構造的な要素を明らかにするために部位特異的置換体を作成し、同様の解析を行い、異なるサブタイプ間における二量体形成パターンの違いを生じる要因となる残基を同定した。今後はこれらの結果に基づき疾患感受性アリルに特異的に結合するペプチドの探索を行う計画である。

进行这项研究的目的是阐明HLA II类等位基因的结合特异性，这与睡眠障碍高度相关。睡病的主要遗传因素是HLA II类，100％的日本患者组在DNA序列水平上具有相同的等位基因（DQB1*0602）。这一发现强烈表明，基于HLA II类的自身免疫反应参与了睡病的发育，但是这种机制的机制尚不清楚。在这项研究中，我们进行了研究，目的是鉴定特异性结合到DQB1*0602的自身抗原肽，以阐明在麻醉症发作中涉及HLA II类的机制。为此，我们首先专注于耐疾病的HLA等位基因的功能，这是从遗传研究中揭示的。具体而言，旨在阐明等位基因DQB1 *0501和 *0601等位基因的作用，当保留伴有疾病敏感等位基因的异性疾病时，认为这些等位基因是抗病等位基因的作用，并阐明了其他HLA-DQ Electibolations nimer septrofic nimer septrofe syer的能力，该作用的作用，是疾病的效果，该疾病的效果是dimer syer的效果，该疾病的效果是有效的。使用昆虫细胞表达系统，哺乳动物成纤维细胞和基于B细胞的培养细胞分析HLA-DQ等位基因。结果表明，已确定为抗性等位基因的DQB等位基因的抗病性可能会受到与此等位基因不平衡的DQA等位基因的影响，目前正在准备提交这些结果。另外，创建了位点特异性的替换，以阐明这些二聚体形成模式中涉及的结构元素，并进行了类似的分析以识别可能导致不同亚型之间二聚体形成模式差异的残基。将来，我们计划根据这些结果搜索特异性与疾病敏感等位基因的肽。