神経伝達物質放出の同期性を担うシナプトタグミン1とSNARE複合体の結合の役割
突触结合蛋白 1 和 SNARE 复合物结合在神经递质释放同步中的作用
基本信息
- 批准号:18800027
- 负责人:
- 金额:$ 1.79万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
シナプス小胞の開口放出は、カルシウムセンサーの最有力候補シナプトタグミン1と、膜融合装置SNAREによって引き起こされると考えられているが、「どのようにしてシナプトタグミン1がSNAREによる膜融合を引き起こすのか」は不明である。シナプトタグミン1とSNAREの一つであるシンタキシン1の結合の生理的意義を明らかにする目的で、本年度は両者の結合の生化学的性状を調べシンタキシン1のシナプトタグミン1結合部位を同定し、その部位の変異が伝達物質放出に及ぼす影響を検討した。ラット脳から可溶化したタンパク質を免疫沈降したところ、シナプトタグミン1とSNAREとの結合が観察され、その結合量はカルシウムイオン(Ca^<2+>)の有無で差がなかった。組替えタンパク質同士での結合実験においても、脳から可溶化した場合と同様にCa^<2+>非依存性の結合が観察された。これらの結果は、Ca^<2+>流入前の神経終末においてシナプトタグミン1がSNAREに直接結合する可能性を示しており、我々の仮説を支持する。次に、シナプトタグミン1との結合に関わるシンタキシン1の領域を明らかにするために、カルボキシル末端に点在するグルタミン酸(E)あるいはアスパラギン酸(D)に着目し、それぞれをグルタミン(Q)あるいはアスパラギン(N)に置換した。E224Q/E228Qの二重変異を導入したシンタキシン1ではシナプトタグミン1への結合が消失した。このことから、シナプトタグミン1への結合にはシンタキシン1の224番目と228番目のグルタミン酸が重要であることが明らかとなった。E224Q/E228Q変異シンタキシン1を初代培養神経細胞に発現させ、神経伝達物質放出に対する影響を電気生理学的に解析した。
据认为,突触vyulus的开放释放是由Sinapto Tagmin的最强大的候选者和胶片融合装置圈养而引起的,但未知“ Sinapto Tagmin 1是如何导致Snare Membrane Fusion的”。为了阐明语法1的键合的生理意义,Snapto tagmin 1和Snare之一,检查了两者之间的键的生化特性,并确定了Sinapto tagmin 1结合部分的生化特性,并确定了Sinapto tagmin 1的结合部分。并确定了位点的一部分。当大鼠脑的溶脂蛋白免疫时,观察到Sinapto tagmin 1和SNARE之间的键,并且由于存在或不存在钙离子(Ca^<2+>),结合量没有差异。在对帐蛋白之间的结合实验中,观察到Ca^<2+>非依赖性的结合如从大脑溶解的情况下观察到。这些结果表明,在流入之前神经病学结束时,Sinapto Tagmin 1可以直接粘合到SNARE,并支持我们的假设。接下来,为了阐明与sinapto tagmin 1有关的Sintaxin 1的区域,重点是谷氨酸(E)或散布在羧基末端的天质酸(d)(d),每种都是谷氨酰胺(Q)或芦笋(q)或芦笋(q)。在引入E224Q/E228Q的双重变换时,与Sinaptotagmin 1的结合消失了。这表明,辛加蛋白1的1和228th的第224和228颗谷氨酸很重要。 E224Q/E228Q互助cintaxin 1在第一个培养神经细胞中表达,对神经递质释放的影响进行了电和生理分析。
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Ca^<2+>-binding to synaptotagmin I regulates spontaneous neurotransmitter release
Ca^<2>-与突触结合蛋白 I 结合调节自发神经递质释放
- DOI:
- 发表时间:2008
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:K.Kashibuchi;T.Taleb;A.Jamalipour;Y.Nemoto;N.Kato;二村 智康;嶋田 光洋;嶋田 光洋;二村 智康;深田 宗一朗 等;池本 円 等;深田 宗一朗 等;鈴木 直輝 等;辻川 和丈 等;林 芳紀;David Isracli 等;林 芳紀;深田 宗一朗 等;Tei-ichi Nishiki
- 通讯作者:Tei-ichi Nishiki
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西木 禎一其他文献
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蛋白激酶 C 引起的 Cortactin 磷酸化参与生长锥肌动蛋白动力学的调节
- DOI:
- 发表时间:
2015 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
竹居 孝二;菊池 達也;増本 年男;魏 范研;阿部 匡史;竹田 哲也;西木 禎一;富沢 一仁;渡部 昌実;松井 秀樹;山田 浩司 - 通讯作者:
山田 浩司
西木 禎一的其他文献
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