がん転移形成におけるムコ多糖糖鎖の役割

粘多糖糖链在癌症转移形成中的作用

• 批准号: 06770174
• 负责人: 甲野 裕之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770174/
• 关键词: ムコ多糖; コンドロイチン硫酸; がん転移; 転移抑制; B16BL6細胞

がん細胞の転移課程におけるムコ多糖の役割を解析する目的で、硫酸基およびフコースを多く含有する新規コンドロイチン硫酸(CSK)を用い、ムコ多糖糖鎖の構造とがん転移能との関係について検討を行なった。1.CSKはB16BL6細胞の実験転移能を同程度の硫酸基を含有するヘパリンと同様に抑制したが、主鎖が同一のコンドロイチン硫酸A(CSA)では抑制作用は認められなかった。2.CSKはB16BL6細胞と細胞外マトリクスとの接着には影響せず、in vitroにおけるがん細胞と血管内皮細胞との接着に対しても影響しなかった。また、in vivoでのB16BL6細胞の肺滞留細胞数は実験転移能を抑制したヘパリンでは有意に低下していたがCSKでは全く抑制作用を示さなかった。3.蛍光標識したCSKを用いてB16BL6細胞との結合性について検討した。その結果、B16BL6細胞では細胞膜および核周辺にCSK結合部位が存在し、細胞膜への結合は細胞密度が低い状態の方が高かった。4.CSKは細胞密度の低い条件であるB16BL6細胞のコロニー形成に対して著明な抑制作用を示した。CSKによるコロニー形成抑制作用はCキナーゼ阻害剤であるCalphostin Cの処理により解除された。5.CSK耐性株を樹立し実験転移能を検討した結果、親株よりも有意に転移能が低下していた。CSK耐性株では接着分子の中でCD44の発現がわずかに低下していたが、カドヘリン、ICAM-1、LFA-1、VLA-4の発現は変化が認められなかった。以上の結果から、CSKによる実験転移能の抑制作用はムコ多糖の硫酸基および側鎖のフコース糖鎖による可能性が高く、CSKが細胞と結合することによりCキナーゼなどの細胞情報伝達系に影響を与え、がん転移が抑制される可能性が高いと考えられた。

为了分析粘多糖在癌细胞转移过程中的作用，我们使用含有大量硫酸基团和岩藻糖的新型硫酸软骨素（CSK）来研究粘多糖糖链结构与癌症转移能力之间的关系。我做到了。 1.CSK对B16BL6细胞的实验转移能力的抑制作用与含有相似数量的硫酸基团的肝素相似，但与具有相同主链的硫酸软骨素A（CSA）没有观察到抑制作用。 2.CSK在体外不影响B16BL6细胞与细胞外基质的粘附，也不影响癌细胞与血管内皮细胞的粘附。此外，肝素显着减少了体内驻留在肺部的B16BL6细胞数量，从而抑制了实验的转移能力，但CSK完全没有表现出抑制作用。 3.我们使用荧光标记的CSK研究了与B16BL6细胞的结合。结果表明，在B16BL6细胞中，CSK结合位点存在于细胞膜和细胞核周围，并且当细胞密度较低时与细胞膜的结合较高。 4.CSK在低细胞密度条件下对B16BL6细胞集落形成有明显的抑制作用。 CSK 的集落形成抑制作用可通过 C 激酶抑制剂 Calphostin C 的治疗而消除。 5.建立CSK抗性菌株并检测其实验转移能力，发现其转移能力明显低于亲本菌株。在CSK抗性菌株中，粘附分子中CD44的表达略有下降，但钙粘蛋白、ICAM-1、LFA-1和VLA-4的表达没有观察到变化。从以上结果来看，CSK对实验转移能力的抑制作用极有可能是由于粘多糖的硫酸基和侧链的岩藻糖糖链，并且当CSK与细胞结合时，影响细胞信号转导系统人们认为C-激酶等抑制癌症转移的可能性很高。