咀嚼筋への局所的遺伝子導入法を用いた筋機能改善とそれに伴う骨格性開咬の阻止

利用局部基因转移至咀嚼肌来改善肌肉功能并预防骨骼开合

• 批准号: 17791511
• 负责人: 菅崎 弘幸
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791511/
• 关键词: 局所的遺伝子導入法; 咀嚼筋; 非ウイルス; 開咬; 顎顔面頭蓋; 顎変形症; IGF-1

本研究は、成長期開咬モデルラット咬筋への各サイトカイン遺伝子導入を行い筋発達を促すことで垂直的顔面パターンの増悪が抑制できるのではないかとの仮説の元、実験動物への局所的遺伝子導入実験を行い、仮説の検証を行った。はじめにLoss of function実験系として成長期ラット(6週齢)に対し、片側咬筋に反復的IGF-1receptor siRNA発現プラスミド局所的遺伝子導入をHVJ-エンベロープベクター法を用いて行った。反対側にはempty vectorを導入した。導入側での咬筋成長・発育に関する影響ならびに下顎骨形態への影響を検索すべく、6週後に通法に従い屠殺し、咬筋重量測定、マイクロCT撮影装置を用いて下顎骨形態計測を行った。咬筋重量は、反復的IGF-1receptor siRNA導入側において、コントロール側に比較して優位に低値を示し、肉眼的にも頬舌的厚みが減少していた。マイクロCTを用いた下顎骨形態計測では、反復的IGF-1receptor siRNA導入側において下顎切痕後方部の下方への隆起量が減少しており、ヒトでの下顎角開大に類似した形態的特徴を示した。組織学的検索は現在まだ行っていないが、上記の垂直的顎間関係に影響を与えるデータが出ていることからIGF-1受容体の発現ノックダウンと、それに伴う筋芽細胞増殖・分化抑制が生じていることが予想される。次に、Gain of function実験系として反復的IGF-1発現プラスミド局所的遺伝子導入をHVJ-エンベロープベクター法を用いて行った。上記の反復的IGF-1receptor siRNA導入とはちょうど逆の結果が得られ、IGF-1が咬筋筋量の制御に大きな役割を果たしていることが観察された。さらに、咬筋筋量を人為的に制御することで、垂直的顎間関係の制御も行える可能性が示唆された。

这项研究在实验动物中进行了局部基因转移实验，以基于以下假设来检验假设，即通过将细胞因子基因引入大鼠咬合模型中的大鼠肌肉肌肉并促进肌肉发育，可以抑制垂直面部图案的恶化。引入功能实验系统的丧失，使用HVJ-Envelope矢量方法在功能大鼠（6周龄）的丧失功能大鼠（6周龄）中，在单方面kseter肌中进行了重复的IGF-1受体表达质粒局部基因转移。另一侧引入了一个空的矢量。为了搜索对咬合肌肉生长和发育对引言侧和下颌骨形态的影响，六周后根据通常的方法牺牲了患者，并使用咬肌肌肉和微克成像装置来测量下颌骨的形态。与对照侧相比，重复的IGF-1受体siRNA引入侧的肌肉体重主要降低，而Bubolingus的厚度也严重降低。使用MicroCT使用MicroCT的下颌形态计量学显示，重复的IGF-1受体siRNA介绍侧的下颌后槽口下方的脊数量有所下降，显示出类似于人类的下颌角开口的形态特征。尽管尚未进行组织学搜索，但已经释放了影响上述垂直垂直间亲戚关系的数据，预计IGF-1受体的表达敲低以及对肌细胞增殖和分化的相关抑制正在发生。接下来，作为功能实验系统的增益，使用HVJ-Envelope矢量法进行了重复的IGF-1表达质粒局部基因转移。结果与上述重复的IGF-1受体siRNA转移完全相反，并且观察到IGF-1在调节咬合肌肉质量中起主要作用。此外，已经提出，通过人为地控制咬肌质量，也可以控制垂直互动关系。