ヒト卵子の老化を引き起こす卵胞液ストレス物質の同定

鉴定导致人类卵子衰老的卵泡液应激源

• 批准号: 17791148
• 负责人: 岩崎 稚子
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Research Institute for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17791148/
• 关键词: 不妊; 卵胞液; ストレス; 老化; プロテオミクス

卵胞液は卵子が成熟する過程で卵胞内に蓄積し、卵子や顆粒膜細胞の質に影響を与える重要な役割を担っている。不妊症患者の卵胞液中に含まれる様々な因子が、妊孕性の低下と深く関わっていること考えられるが、その実体については解明されていない。本研究では、不妊症患者より採取した卵胞液中で顆粒膜細胞を培養し、高齢不妊症患者から得た卵胞液中の顆粒膜細胞で明らかにミトコンドリア活性が低下し、加齢により何らかのストレス物質が卵胞液中に蓄積している可能性が示唆された。そこで、ヒト卵胞液の生化学的分画を試み、卵子の老化との因果関係について検討した。HPLCゲル濾過分画により比較的ストレスの強い画分を選別することに成功したが、非常に小さい分子(MW1,000>)であり分子の同定には至っていない。しかしながら、ミトコンドリア膜電位の変化を促進し、細胞機能に影響を与える重要な因子である可能性が示唆された。一方で,男性不妊患者の卵胞液における抗ストレスカアッセイにより,ストレスを強く受けたサンプルとストレスを受けていないサンプルを選別し,各患者の顆粒膜細胞における老化マーカーの選別に成功した。顆粒膜細胞株において過酸化水素水やFSHなどで刺激を加えたところ,老化マーカーは強く発現亢進されることが明らかになった。現在,卵胞液画分が老化マーカーの発現を変化させるかどうか検討を進めているが,生殖細胞の老化を示す上で,非常に重要なマーカーとなるであろう。

随着卵的成熟，卵泡液积聚在卵泡中，并在影响卵和颗粒细胞的质量中起着重要作用。人们认为，不育患者的卵泡液中包含的各种因素与生育能力的下降深度参与，但这些因素的实质尚未澄清。在这项研究中，在从不育患者中收集的卵泡液中培养了颗粒细胞，并在从老年不育患者那里获得的卵泡液中的颗粒细胞中明显降低了线粒体活性，这表明某种胁迫物质可能会因老化而导致的卵泡液中积累。因此，我们试图对人卵泡液的生化分馏，并检查了与卵老化的因果关系。尽管HPLC凝胶过滤部分在选择相对应力的馏分方面取得了成功，但它们是非常小的分子（MW1,000>），无法鉴定分子。但是，已经提出，这可能是促进线粒体膜电位变化并影响细胞功能的重要因素。另一方面，通过对雄性不育患者的卵泡液中的抗压力测定，选择了强烈压力和无重力的样品，并在每个患者的颗粒细胞中成功选择了衰老标记。用颗粒细胞系中用过氧化氢或FSH进行刺激，并发现衰老标记物大大增加。目前，我们正在研究卵泡液的分数是否会改变衰老标记的表达，这将是表明生殖细胞衰老的非常重要的标记。

项目成果

Glutathione S-transferase thetal expressed in granulosa cells as a biomarker for oocyte quality in age-related infertility

颗粒细胞中表达的谷胱甘肽 S-转移酶 thetal 作为年龄相关不孕症卵母细胞质量的生物标志物

• 发表时间: 2007
• 期刊: Fertility and Sterility (In press)
• 作者: Ito M;Muraki M;Takahashi Y;Iwasah W;et. al.
• 通讯作者: et. al.