化学療法耐性克服における放射線療法の意義-新しい胃癌治療戦略を目指して-

放疗在克服化疗耐药中的意义 - 寻找新的胃癌治疗策略 -

• 批准号: 17790926
• 负责人: 清田 毅
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790926/
• 关键词: 胃癌; 抗癌剤耐性; 化学放射線治療; シスプラチン; アポトーシス

1.放射線照射・抗癌剤曝露の併用効果の検討:ヒト胃癌細胞株3種(TMK-1/MKN-45/MKN-74)において、放射線+CDDPおよび放射線+5-FUの相乗効果が確認され、中でもMKN-45に対する放射線紀DDPで相乗効果が著明であった。2.放射線照射・CDDP短期曝露によって変動する因子の同定:(1)形態変化:各cell lineにおいて、5-FUまたはCDDP曝露により細胞間橋の脆弱化・扁平化・突起を有する形態変化を認めた。一方Radiationでは細胞の扁平化は認めず、核の変形・細胞質の不均一化を示し、アポトーシスの典型像と一致し、化学療法とは異なる変化をみた。(2)アポトーシス発現の動的変化測定:MKN-45におけるCDDP・5-FU・放射線の併用により誘導されるアポトーシスの定量(Cell Death Detection ELISAPLUS : Roche Applied Systems)を行い、抗癌剤単独曝露群では得られなかったアポトーシスの増強を放射線照射群で認め、抗癌剤を追加することで更なるアポトーシスの増強を認めた。(3)候補遺伝子発現の動的変化測定:MKN-45に対し放射線・CDDPを併用する実験系にて、非暴露群、CDDP暴露24hr/48hr後、CDDP・放射線併用24hr/48hr後の細胞を採取し、全mRNAを単離抽出してm-RNA相対定量PCR法を適用し、変動候補遺伝子(ABCC 1・2・11、ERCC 1)につき各群を条件を変更しながら測定試行中である。3.CDDP長期曝露による耐性株の作成:CDDPを長期暴露し、MTT法・Cell Count法にて耐性を評価、実験を繰り返し行い、耐性株を作製した。耐性株に対する放射線照射による細胞増殖抑制効果も確認された。現在CDDP耐性獲得に関わる因子を評価・抽出し、放射線照射による変動測定中である。

1.检查放射线照射和抗癌药物暴露的联合效应：在三种人胃癌细胞系（TMK-1/MKN-45/MKN-74）中证实了放射线+CDDP和放射线+5-FU的协同作用其中，与radichronic DDP对抗MKN-45的协同作用显着。 2. 确定因放射线照射/CDDP短期暴露而发生变化的因素： (1)形态变化：在各细胞系中，观察到由于5-FU或5-FU或细胞间桥减弱、变平、突出等形态变化。 CDDP 暴露。另一方面，放射治疗并没有表现出细胞扁平化，而是出现了核变形和细胞质异质性，这与细胞凋亡的典型现象一致，但与化疗不同。 (2)细胞凋亡表达的动态变化的测量：在MKN-45(细胞死亡检测ELISAPLUS：Roche Applied Systems)中对由CDDP、5-FU和放射线的组合诱导的细胞凋亡进行定量，观察到细胞凋亡的增强。放射线照射组，加入抗癌药物后观察到细胞凋亡进一步增强。 (3)候选基因表达动态变化的测量：在MKN-45联合使用辐射和CDDP的实验系统中，非暴露组的细胞、CDDP暴露24小时/48小时后和24小时后/48小时CDDP和辐射暴露我们正在进行一项试验，通过分离和提取总mRNA并应用m-RNA，改变各组的条件来测量可变候选基因（ABCC 1,2,11,ERCC 1）相对定量PCR方法。 3、长期接触CDDP产生耐药菌株：长期接触CDDP后，采用MTT法和细胞计数法评价耐药性，并重复实验产生耐药菌株。放射线照射对耐药菌株的细胞增殖抑制作用也得到证实。我们目前正在评估和提取与 CDDP 耐药性获得相关的因素，并测量辐射暴露引起的变化。