Notchシグナル阻害剤によるヒト白血病(T-ALL)の新規分子標的療法の開発

使用Notch信号抑制剂开发新型人类白血病（T-ALL）分子靶向疗法

基本信息

批准号：
17790637
负责人：
増田茂夫
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒトT-ALL Xenograftモデルによるγ-セクレターゼ阻害剤の抗腫瘍効果、およびそのメカニズムの検証我々はこれまでT-ALLの本邦成人症例においてもNotch1遺伝子変異が一定の頻度(14例中5例)で検出されることを確認してきた。同遺伝子変異を有するヒトT-ALL細胞株を対象に、Notchシグナル阻害剤(γ-セクレターゼ阻害剤)への反応性をin vitroで調べたところ、単剤でアポトーシス誘導が観察された。そこで我々はin vivoでのγ-セクレターゼ阻害剤の抗腫瘍効果を評価した。既にヒトT-ALL細胞株がSCIDマウスへ生着すること、さらには時系列での腫瘍体積の定量性を確認しており、腫瘍細胞株を皮下接種の上、一定体積に達したのちに同剤を連日経口投与した。結果、10日から2週間でほぼ完全な腫瘍の退縮を観察した。この現象の作用機序として、(1)腫瘍細胞の直接のアポトーシス、のほか、(2)腫瘍血管新生の抑制、が関与すると考えられた。このことは腫瘍局所の組織中の血管内皮細胞を免疫染色で定量評価した結果に基づく。次に我々は、dual functionを有すると考えられるγ-セクレターゼ阻害剤の作用メカニズムを確証する目的で、同剤感受性を有するヒトT-ALL細胞株DND-41に、活性型Notch1(aN1)をレトロウイルスベクターで感染させ、in vitroで同剤抵抗性を獲得させた。DND-41-aN1株が、in vivoでγ-セクレターゼ阻害剤投与時に先述(2)の影響を受けるかを検討したところ、(2)に代表される腫瘍微小環境(腫瘍間質)への作用が意外にも大きいことが判明した。以上より、ヒト白血病(T-ALL)のXenograftモデルにおいて、Notchシグナル阻害剤であるγ-セクレターゼ阻害剤が著明な抗腫瘍効果を呈し、少なくとも2つの作用機序を有することが示唆された。

通过人类T-All异种移植模型对γ-分泌酶抑制剂的抗肿瘤效应和机制的验证我们已经证实，在日本成人T-ALL的日本成人病例中，在一定频率（14例）中检测到Notch1基因突变。当在携带相同基因突变的人类T-ALL细胞系中检查对Notch信号抑制剂（γ-分泌酶抑制剂）的反应性时，单个药物观察到凋亡诱导。因此，我们评估了体内γ-分泌酶抑制剂的抗肿瘤作用。人类T-ALL细胞系已经植入了SCID小鼠，并且已经确认了肿瘤体积的定量确定。皮下接种肿瘤细胞系后，然后将肿瘤细胞系带到一定体积，并每天口服同一药物。结果，在10天到2周内观察到几乎完全的肿瘤消退。人们认为这种现象的作用机理涉及（1）肿瘤细胞的直接凋亡，以及（2）抑制肿瘤血管生成。这是基于通过免疫染色的局部肿瘤组织中血管内皮细胞的定量评估。接下来，我们以具有逆转录病毒载体的活性形式的Notch1（AN1）感染了相同敏感的人T-All细胞系DND-41，以确定γ-分泌酶抑制剂的作用机理，被认为具有双重功能，并在体外获得了同一敏感性的抗性。当我们研究在体内施用γ-分泌酶抑制剂时DND-41-AN1菌株是否受（2）影响（2）时，发现对（2）代表的肿瘤微环境（肿瘤基质）的影响非常大。从以上提出，在人类白血病（T-ALL）的异种移植模型中，γ-分泌酶抑制剂（一种缺口信号抑制剂）表现出明显的抗肿瘤作用，并且至少具有两种作用机制。