小胞体シャペロンおよび下流シグナル分子の制御による膵β細胞機能の調節

通过调节内质网伴侣和下游信号分子来调节胰腺 β 细胞功能

• 批准号: 17790610
• 负责人: 近藤 龍也
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790610/
• 关键词: 小胞体ストレス; 糖尿病; 小胞体シャペロン; 膵β細胞

(1)小胞体ストレスシグナル分子の遺伝子導入マウスの作製平成17年度の研究にて明らかになった、小胞体ストレス応答の軽減に寄与するであろう小胞体ストレスシグナル分子を遺伝子導入したトランスジェニックマウス、もしくは遺伝子機能を抑制したノックアウトマウスを作製する。1.小胞体ストレスシグナル分子としてBip(GRP78)を選択した。2.トランスジーン構築に関しては、CAGプロモーター下流にloxpに挟まれたCAT配列を配し、その下流にBip cDNAを挿入した。3.細胞に導入し、Cre存在下でCAT配列の削除とBip mRNAの転写開始・増強を確認した。4.同トランスジーンを導入したトランスジェニックマウスラインを9つ得た。5.組織特異的(肝臓・膵β細胞)にBip発現を誘導するため、Alb-Creマウス(肝臓特異的)・RIP-Creマウス(膵β細胞特異的)との交配を進めている。(2)小胞体ストレスシグナル分子の遺伝子導入マウスの解析にて作製したマウスに視床下部摂食制御中枢を破壊するGTG(gold tioglucose)を投与して過食にし、肥満・高血糖を示す2型糖尿病モデルマウスを作製、生体内における膵β細胞機能を解析する。また異常インスリンを生成することで小胞体ストレスを惹起するAkitaマウスと交配させ、膵β細胞における小胞体ストレス応答反応を検討する。現在、上記(1)で進行中のマウス作成中であり、臓器特異的Bipの過剰発現を確認でき次第、(2)の実験を行う予定である。

（1）在2005年的一项研究中揭示了用内质网应激信号分子的小鼠转基因的制备是由经转基因小鼠产生的，这些小鼠曾经具有内胞质网状应激信号分子，这些小鼠可能有助于减少腹膜衰减应力反应，或抑制gene gene gene的功能。 1。BIP（GRP78）作为内质网应激信号分子选择。 2。关于转基因的构建，将夹在LOXP之间的CAT序列放置在CAG启动子的下游，并将Bip cDNA插入CAG启动子的下游。 3。将细胞引入细胞，并缺失CAT序列，并在CRE存在下确认BIP mRNA的转录和增强。 4。获得了九种具有相同转基因引入的转基因小鼠线。 5。为了以组织特异性方式诱导BIP表达（肝脏和胰腺β细胞），与Alb-Cre小鼠（肝脏特异性）和RIP-CRE小鼠（胰腺β细胞特异性）交配。 （2）通过对内质网应力信号分子进行分析产生的小鼠通过施用GTG（金丁香糖）来暴饮暴食，该小鼠破坏了下丘脑进食控制中心，并创建了一种2型2型糖尿病模型，该模型显示出肥胖和超级症状，并创建了肥胖症和超级症状。此外，将细胞与Akita小鼠交配，该小鼠会产生异常的胰岛素以诱导内质网应激，并检查了胰腺β细胞中对网状应激的反应。目前，目前正在（1）中正在进行中的小鼠，并且在确认器官特异性的BIP过表达后，（2）中的实验将立即进行。

项目成果

Diabetes Frontier(ERストレスと糖尿病)

糖尿病前沿（ER 压力和糖尿病）

• 发表时间: 2006
• 作者: 荒木栄一;近藤龍也
• 通讯作者: 近藤龍也