ジアシルグリセロールキーナゼの糖・脂質代謝調節における役割

二酰甘油奎酶在糖脂代谢调节中的作用

基本信息

批准号：
17790597
负责人：
高橋伸彦
金额：
$ 2.05万
依托单位：
Asahikawa Medical College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790597/
关键词：
糖代謝脂質代謝

项目摘要

昨今メタボリック症侯群が注目されている通り、糖代謝と脂質代謝は密接に関与している。本研究では脂質中間体の調節酵素であるdiacylglycerol kinase(DGK)の糖代謝と脂質代謝への影響を検討することが目的である。昨年度私は、骨格筋紬胞モデルとしてマウスC2C12細胞を用い、 DGKisoform(α,δ,ε,ζ,θ)の発現を確認した。そしてDGK阻害剤であるR59022のC2C12細胞における糖取り込み促進作用を発見した。今年度はその機序の解析を進めた。C2C12細胞に24時間R59022を作用させ解析した。IRS-1チロシンリン酸化、IRS-1/PI3K association、AktやAMPKリン酸化の亢進は認めなかった。また、Aktの下流で糖取り込みに関与するとされるAS160のリン酸化を検討したが、R59022処理は予想に反してリン酸化を抑えていた。p38 MAPK(p38)はGLU74活性化を介した糖取り込み促進に関与すると報告されているが、R59022は対照に比べ約3倍P38のリン酸化を亢進させ、実際に酵素活性上昇もIP-Kinase assay法にて確認した。さらにp38の阻害剤であるSB203850はR59022を24時間処理した場合の糖取り込み促進作用を対照レベルまでblockした(昨年度は8時間R59022を処理しwortmanninにて部分的blockを見いだしたが、24時間処理ではblockしなかった)。以上の結果よりR59022はP38の活性化を介してC2C12細胞の糖取り込み促進作用を引き起こすことがわかった。さらにR59022はp38の上流であるMKKのリン酸化を引き起こすことがわかり、R59022の作用点はP38より上流にあることが示唆された。以上の成果は英文誌に投稿準備中である。

由于如今的代谢综合征一直在引起人们的注意，因此葡萄糖代谢和脂质代谢非常涉及。这项研究旨在研究二酰基甘油激酶（DGK）（DGK）（一种用于脂质中间体的调节酶）对葡萄糖代谢和脂质代谢的影响。去年，我将小鼠C2C12细胞用作骨骼肌细胞模型，并证实了DGKISOODORM（α，δ，ε，ζ，θ）的表达。然后，我们发现了DGK抑制剂R59022的作用，以促进C2C12细胞中的糖吸收。今年，我们一直在分析该机制。通过作用R59022分析C2C12细胞24小时。未观察到IRS-1酪氨酸磷酸化，IRS-1/PI3K关联，AKT或AMPK磷酸化的增加。我们还研究了AS160的磷酸化，据说该磷酸化与AKT下游的糖摄取有关，但是R59022治疗抑制了磷酸化，这与预期相反。尽管据报道，p38 MAPK（p38）通过GLU74激活参与促进糖的摄取，但与对照组相比，R59022促进p38磷酸化约为三倍，酶活性的实际增加得到了ip-kinase Assay方法的确认。此外，当用R59022处理24小时至控制水平时，SB203850是P38的抑制剂，阻塞了糖吸收剂的效果（去年，R59022治疗了8小时，在Wortmannin中发现了部分块，但在24小时内没有阻止它）。从上面的结果中可以发现，R59022通过激活p38促进了C2C12细胞的糖蛋白蛋白酶启动子。此外，发现R59022引起p38上游MKK的磷酸化，这表明R59022的作用点是p38的上游。目前正在准备上述结果提交英语期刊。