腎糸球体内微小血栓の形成過程における白血球接着因子の機能解析と治療への応用

肾小球内微血栓形成过程中白细胞粘附因子的功能分析及治疗应用

基本信息

批准号：
17790547
负责人：
平橋淳一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

血栓と出血が臓器障害をもたらす実験系として、抗糸球体基底膜抗体(ウサギ血清)とLPSを投与することによりマウス血栓性出血性糸球体腎炎モデルを構築した。これは糸球体内血栓と血尿、急性腎不全および血小板減少を呈しヒトの溶血性尿毒症症候群(HUS)に酷似する。この病変は好中球を除去したマウスでは有意に予防されることから、このモデルは好中球に依存する。また、白血球接着因子Mac-1あるいは好中球エラスターゼ(NE)欠損マウスにおいて病変は著明に予防された。さらに、Mac-1欠損マウスではフィブリンのエラスターゼによる分解産物の生成が抑制されていたことより、Mac-1が生体でのエラスターゼの活性を制御している可能性を示した。また、このモデルにおける血小板の関与を調べるため血小板を免疫学的に除去したマウスにおいて病変を惹起したところ、予想に反して腎不全は著しく増悪し致死的であった。ところが、Mac-1欠損マウスにおいて血小板を除去してこのモデルを誘導しても病変はほぼ完全に抑制されたままであった。これらのことは、血小板が病初期に傷害される血管を止血機序により保護している可能性を示し、またMac-1が病態の絶対的決定因子であることを示唆する。さらに、病初期の炎症性サイトカインおよびケモカイン32種類を測定したところ、野生型マウスとMac-1欠損マウスではそれらの血中濃度はほぼ同等であったことである。すなわち、サイトカインが豊富に存在してもMac-1をブロックするだけで病変はほぼ完全に抑制されることを示す。このように、好中球が主体となるし血栓性糸球体腎炎モデルではMac-1が決定的な役割を果たすことを解明し、治療的予防的可能性を示すことができた。これらの結果について現在論文投稿中である。

小鼠血栓性出血性肾小球肾炎模型是通过施用抗斜大基底膜抗体（兔血清）和LPS构建的，作为实验系统，在该系统中，血栓形成和出血会导致器官损伤。这与具有倾斜体内血栓和血尿，急性肾衰竭和血小板减少症的人类溶血性尿毒症综合征（HUS）非常相似。该模型是嗜中性粒细胞依赖性的，因为在中性粒细胞中去除的小鼠中，这种病变是显着阻止的。此外，缺乏白细胞粘附因子MAC-1或中性粒细胞弹性酶（NE）的小鼠明显预防病变。此外，在MAC-1缺陷型小鼠中抑制了纤维蛋白弹性酶的降解产物的产生，这表明MAC-1可以调节弹性酶在活生物体中的活性。此外，当通过免疫学去除血小板以研究血小板参与该模型的小鼠中，肾衰竭显着恶化和致命，与期望相反。但是，即使去除血小板并在MAC-1缺陷小鼠中诱导了该模型，病变仍几乎完全抑制。这些表明血小板可以保护止血病早期受伤的血管，并表明MAC-1是病理学的绝对决定因素。此外，测量了该疾病早期阶段的32种类型的炎性细胞因子和趋化因子，并且野生型小鼠和MAC-1缺陷小鼠的血液浓度几乎相同。也就是说，即使细胞因子丰富，通过阻止MAC-1，几乎完全抑制了病变。因此，我们已经能够阐明中性粒细胞是主要的中间粒细胞，并且Mac-1在血小板肾小球肾炎模型中起着至关重要的作用，表明具有治疗和预防性治疗的潜力。这些结果目前正在提交。