核内受容体とWntシグナルとのクロストークによる糖・脂質代謝調節機構の解析

通过核受体与Wnt信号串扰分析糖脂代谢调控机制

• 批准号: 17790204
• 负责人: 田中 十志也
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790204/
• 关键词: PPARδ; LRP5; GSIS; Wnt4; Wnt3a; L6筋管細胞; グルコース取り込み; IRS1

PPARδの膵島における役割を明らかにする目的で,グルコース応答性のインスリン分泌(GSIS)に及ぼすPPARδアゴニストの影響を検討した.その結果,PPARδアゴニストのGW501516は用量依存的にインスリン分泌を促進することを明らかとした.インスリン分泌促進作用の機序を明らかにするため,ATP/ADP比を測定したが有意な影響は認められなかった.また,DNAマイクロアレイ解析を用いて膵島におけるPPARδ標的遺伝子の検索を行ったところ,脂肪酸代謝に関連する遺伝子に加えWntの受容体であるLRP5の誘導が認められた.定量的PCR法を用いてWnt関連遺伝子に及ぼすPPARδアゴニストの影響を検討したところ,LRP5に加えLRP6やsFRP4の誘導が認められた.しかし,PPARδアゴニストはLRP5ノックアウトマウスの膵島においてもGSISを亢進させたことから,LRP5-Wntシグナル系を介した作用ではないことが示唆された.脂肪細胞分化におけるWntシグナルの役割とPPARγ発現に及ぼす影響を検討するため,定量的PCRを用いてWnt4およびLRP5の遺伝子発現変動について経時的に測定した.Wnt4は分化開始初期に一過性の誘導が認められ,その後発現が低下した.一方,LRP5は経時的な発現誘導パターンを示した.PPARγの発現はWnt4の一過性の発現上昇の後に認められた.骨格筋のインスリン感受性に及ぼすWnt/LRPシグナルの関与を明らかにするため,L6筋管細胞にWnt3a conditioned medium添加し,インスリン存在,非存在下における2-デオキシグルコースの取り込みを測定した.その結果,Wnt3a処理によりL6筋管細胞でのグルコースの取り込み亢進が認められた.Wnt3aはインスリン受容体基質IRS1のmRNAおよびタンパク発現を誘導した.

为了阐明PPARδ在胰岛中的作用，我们研究了PPARδ激动剂对葡萄糖反应性胰岛素分泌（GSIS）的影响。结果，我们发现PPARδ激动剂GW501516以剂量依赖性方式促进胰岛素分泌。为了阐明胰岛素分泌作用的机制，测量了ATP/ADP比率，但未观察到显着影响。此外，当我们使用DNA微阵列分析搜索胰岛中的PPARδ靶基因时，除了与脂肪酸代谢相关的基因外，LRP5（LRP5）的诱导。我们使用定量PCR方法研究了PPARδ激动剂对WNT相关基因的影响，并发现除LRP5外，LRP6和SFR。观察到P4的诱导。但是，PPARδ激动剂还增强了LRP5敲除小鼠胰岛中的GSIS，这表明它们不是通过LRP5-WNT信号系统的效果。为了研究Wnt信号在脂肪细胞分化中的作用及其对PPARγ表达的影响，我们使用定量PCR测量了Wnt4和LRP5的基因表达变化。 Wnt4在分化开始时是短暂诱导，随后降低了表达。同时，LRP5随着时间的推移显示出表达诱导的模式。 Wnt4短暂诱导后观察到PPARγ表达。为了阐明Wnt/LRP信号在骨骼肌中胰岛素敏感性的参与，在L6 Myotube细胞中观察到Wnt3a。在存在和不存在胰岛素的情况下，添加条件培养基以测量2-脱氧葡萄糖的摄取。结果，WNT3A的处理显示L6肌管中葡萄糖的摄取增加。 WNT3A诱导胰岛素受体底物IRS1的mRNA和蛋白质表达。

项目成果

Gene expression profiling of potential peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR) target genes in human hepatoblastoma cell lines inducibly expressing PPAR isoform

诱导表达 PPAR 亚型的人肝母细胞瘤细胞系中潜在过氧化物酶体增殖物激活受体 (PPAR) 靶基因的基因表达谱

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nucl.Recept 3
• 作者: Tachibana K.;Tanaka T.;et al.
• 通讯作者: et al.

SOX6 attenuates glucose stimulated insulin secretion by repressing PDX1 transcriptional activity and is down-regulated in hyperinsulinemic obese mice.

SOX6 通过抑制 PDX1 转录活性来减弱葡萄糖刺激的胰岛素分泌，并且在高胰岛素肥胖小鼠中下调。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biol.Chem. 280
• 作者: Iguchi H.;Tanaka T.;et al.
• 通讯作者: et al.