重金属やストレス環境で誘導されるメタロチオネインのガン悪性化機構における役割

重金属和应激环境诱导的金属硫蛋白在肿瘤恶变机制中的作用

• 批准号: 17790105
• 负责人: 瀧口 益史
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Hiroshima International University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790105/
• 关键词: メタロチオネイン; ストレス; ガン; MMP2; 重金属; 悪性化; メタロチオネイン欠損細胞; SV40 large T抗原

前年度の研究で我々は、MT欠損マウスと野生型マウスの線維芽細胞にSV40 large T抗原を導入し不死化した細胞(前がん細胞モデル)を用い、MT欠損細胞ではマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP2)遺伝子発現が減少しており、MMP2遺伝子産物である68 kDa type IV collagenaseの活性も低下していることを明らかにした。そこで今回、SV40 large T抗原を導入していない初代培養線維芽細胞(正常細胞モデル)を用いた検討より、MTはbasal MMP2遺伝子発現に対して影響しないものの、SV40 large T抗原の共存下MMP2遺伝子発現を増加させることを明らかにした。さらに、肝臓伊東細胞にSV40 large T抗原を導入して不死化した細胞を用いて、由来臓器の異なる細胞でのMMP発現及び活性に対するMTの影響を検討した。ゼラチンザイモグラフィーの結果、野生型とMT欠損マウス肝臓由来の伊東細胞間でMMP2活性に差は見られなかった。線維芽細胞では、MT欠損細胞の方がMMP2活性及び遺伝子発現量とも低かったことから、MTのMMP2に対する影響は細胞の種類により異なることが明らかとなった。一方、MMP2と同様に癌の転位・浸潤に関係する94 kDa type IV collagenase(MMP9)の活性はMT欠損伊東細胞の方が顕著に低かった。そこで、MMP9 mRNA発現量を検討したところ、MT欠損伊東細胞の方が低かったものの、その発現量の差はわずかであった。この両細胞間でのMMP9活性の顕著な差は、MMP9発現量の差のみでは説明できないと考えられた。MMPは細胞外マトリックス構成成分を分解する一群の酵素であり、活性中心に亜鉛を持つ金属酵素である。このことから、亜鉛結合蛋白質であるMTがMMP9に対して亜鉛供与体として働いている可能性が考えられた。

在前一年的研究中，我们将SV40大T抗原导入MT缺陷小鼠和野生型小鼠的成纤维细胞中，使其永生化（癌前细胞模型）基因表达降低，并且68 kDa IV型胶原酶的活性， MMP2基因产物也减少了。因此，在本研究中，我们使用未导入SV40大T抗原的原代培养的成纤维细胞（正常细胞模型）进行了研究，发现虽然MT对基础MMP2基因表达没有影响，但在存在的情况下MMP2基因表达SV40 大 T 抗原的研究表明，它增加了此外，我们使用通过引入SV40大T抗原永生化的肝Ito细胞研究了MT对来自不同来源器官的细胞中MMP表达和活性的影响。明胶酶谱显示野生型和 MT 缺陷型小鼠肝脏来源的 Ito 细胞之间的 MMP2 活性没有差异。在成纤维细胞中，MT缺陷细胞的MMP2活性和基因表达水平均较低，表明MT对MMP2的影响因细胞类型而异。另一方面，与 MMP2 一样，参与癌症转移和侵袭的 94 kDa IV 型胶原酶 (MMP9) 的活性在 MT 缺陷的 Ito 细胞中显着降低。因此，当我们检查MMP9 mRNA表达水平时，尽管在MT缺陷的Ito细胞中MMP9 mRNA表达水平较低，但表达水平的差异很小。人们认为，两种细胞之间 MMP9 活性的显着差异不能仅用 MMP9 表达水平的差异来解释。 MMP是一组降解细胞外基质成分的酶，是一种以锌为活性中心的金属酶。这表明 MT（一种锌结合蛋白）可能充当 MMP9 的锌供体。

项目成果

Metallothionein Cooperates with SV40 Large T-antigen To Sustain Metalloproteinase2 Gene expression in Immortalized Fibroblast cells

金属硫蛋白与 SV40 大 T 抗原配合维持永生化成纤维细胞中的金属蛋白酶2基因表达

• 发表时间: 2005
• 期刊: 5^<th> International Conference on Metallothionein (Abstract) 5
• 作者: Masufumi Takiguchi;et al.
• 通讯作者: et al.

メタロチオネインのSV40 large T抗原との相互作用によるマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP2)発現調節

通过金属硫蛋白与 SV40 大 T 抗原相互作用调节基质金属蛋白酶 2 (MMP2) 表达

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Health Science 51(Suppl)
• 作者: 瀧口 益史;他
• 通讯作者: 他