食品タンパク質中の満腹感促進ペプチドの探索と消化管内分泌細胞におけるその受容機構

寻找食物蛋白中的饱腹感肽及其在胃肠道内分泌细胞中的受体机制

基本信息

批准号：
17780097
负责人：
比良徹
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780097/
关键词：
消化管内分泌細胞食品たんぱく質コレシストキニン満腹感

项目摘要

昨年度の研究において、フジ豆(ツル豆)より調製したペプトン(フジ豆ペプトン)に、食欲抑制作用を有する消化管ホルモンコレシストキニン(CCK)の分泌を強く刺激する活性があることを見いだした。このペプトンが由来するタンパクを明らかにするため、フジ豆たんぱくを等電点沈殿により分画し、各フラクションよりペプトンを調製して、CCK放出活性を調べたところ、等電点5にて沈殿する画分由来のペプトンに強い活性が見られた。この画分には分子量50kDa程のフジ豆の主要タンパクが多く含まれており、プロテインシークエンサーを使ったN末端アミノ酸配列の解析により、Phaseolin様のタンパクであった。Phaseolin由来のペプチドに強いCCK放出活性があることが示唆された。これまでの研究においてCCK産生細胞株STC-1からのCCK放出を刺激することが明らかとなったα-カゼインをリガンドとして、アフィニティー樹脂を用い、CCK産生細胞株STC-1の膜可溶化成分より、種々のα-カゼイン結合タンパクを分離した。プロテインシークエンサーにより解読できた一部のタンパクのアミノ酸配列は、インテグリン、オーファンGPCRと相同性を持っていたことから、これらの分子がα-カゼイン受容体である可能性が考えられた。また、STC-1細胞における細胞内情報伝達経路の解析により、この細胞のα-カゼイン認識において、Gαsタンパクが関与すること、ナトリウムチャネルを介した脱分極により細胞内カルシウムシグナルが惹起されることが明らかとなった。上記の受容体候補との関係を今後検討する。

在去年的研究中，我们发现用富士大豆制备的蛋白胨（富士大豆蛋白胨）具有强烈刺激胃肠道激素胆囊收缩素（CCK）分泌的活性，具有抑制食欲的作用。为了澄清该蛋白胨来源的蛋白质，通过等电点沉淀对藤豆蛋白进行分级，从各级分中制备蛋白胨，并在来自该级分的蛋白胨中观察到强的CCK释放活性。该级分含有大量分子量约为50 kDa的藤豆主要蛋白质，利用蛋白质测序仪对N末端氨基酸序列进行分析表明，其为菜豆蛋白样蛋白质。表明源自菜豆蛋白的肽具有很强的CCK释放活性。使用 α-酪蛋白（在之前的研究中已证明它可以刺激产生 CCK 的细胞系 STC-1 中的 CCK 释放）作为配体，使用亲和树脂分离出各种 α-酪蛋白结合蛋白。使用蛋白质测序仪解码的一些蛋白质的氨基酸序列显示出与整合素和孤儿GPCR的同源性，表明这些分子可能是α-酪蛋白受体。此外，对STC-1细胞的细胞内信号转导途径的分析表明，Gαs蛋白参与这些细胞中的α-酪蛋白识别，并且通过钠通道的去极化诱导细胞内钙信号。与上述候选受体的关系将在未来进行研究。