食品タンパク質中の満腹感促進ペプチドの探索と消化管内分泌細胞におけるその受容機構

寻找食物蛋白中的饱腹感肽及其在胃肠道内分泌细胞中的受体机制

基本信息

批准号：
17780097
负责人：
比良徹
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780097/
关键词：
消化管内分泌細胞食品たんぱく質コレシストキニン満腹感

项目摘要

昨年度の研究において、フジ豆(ツル豆)より調製したペプトン(フジ豆ペプトン)に、食欲抑制作用を有する消化管ホルモンコレシストキニン(CCK)の分泌を強く刺激する活性があることを見いだした。このペプトンが由来するタンパクを明らかにするため、フジ豆たんぱくを等電点沈殿により分画し、各フラクションよりペプトンを調製して、CCK放出活性を調べたところ、等電点5にて沈殿する画分由来のペプトンに強い活性が見られた。この画分には分子量50kDa程のフジ豆の主要タンパクが多く含まれており、プロテインシークエンサーを使ったN末端アミノ酸配列の解析により、Phaseolin様のタンパクであった。Phaseolin由来のペプチドに強いCCK放出活性があることが示唆された。これまでの研究においてCCK産生細胞株STC-1からのCCK放出を刺激することが明らかとなったα-カゼインをリガンドとして、アフィニティー樹脂を用い、CCK産生細胞株STC-1の膜可溶化成分より、種々のα-カゼイン結合タンパクを分離した。プロテインシークエンサーにより解読できた一部のタンパクのアミノ酸配列は、インテグリン、オーファンGPCRと相同性を持っていたことから、これらの分子がα-カゼイン受容体である可能性が考えられた。また、STC-1細胞における細胞内情報伝達経路の解析により、この細胞のα-カゼイン認識において、Gαsタンパクが関与すること、ナトリウムチャネルを介した脱分極により細胞内カルシウムシグナルが惹起されることが明らかとなった。上記の受容体候補との関係を今後検討する。

在去年的一项研究中，我们发现由富吉比（Fujibeans）（Crunch Bean）制备的胸膜（富吉比蛋白酶）具有强烈刺激胃肠道激素胆管蛋白蛋白酶素（CCK）的活性，该活性具有食欲抑制效应。为了阐明该肽得出的蛋白质，通过等电沉淀来分馏富吉豆蛋白，并从每个馏分中制备蛋白质，并检查了CCK释放活性。发现从等电点5下沉淀的分数得出的蛋白质具有很强的活性。该馏分包含来自富吉豆的大量主要蛋白质，分子量约为50 kDa，并且通过使用蛋白序列仪分析N末端氨基酸序列，它是一种阶段蛋白样蛋白。有人提出，衍生自叶蛋白的肽具有强大的CCK释放活性。在先前的研究中发现，使用亲和力树脂刺激CCK从CCK产生的细胞系STC-1释放为配体，亲和力树脂用于将各种α-casein结合蛋白与CCK产生细胞系STC-1的膜溶解成分的各种α-casein结合蛋白分离。由于某些可能被蛋白序列蛋白解密的蛋白质的氨基酸序列与整合素和孤儿GPCR同源，因此认为这些分子可以是α-酶素受体。此外，对STC-1细胞中细胞内信号通路的分析表明，GαS蛋白参与该细胞中α-钙蛋白的识别，并且细胞内钙信号是通过钠通道去极化诱导的。将来将研究与上述受体候选者的关系。