昆虫病原性微胞子虫の宿主細胞適合性〜昆虫およびヒト培養細胞での比較検討

昆虫病原小孢子虫的宿主细胞相容性：昆虫和人类培养细胞的比较研究

• 批准号: 17780041
• 负责人: 青木 智佐
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17780041/
• 关键词: Nosema bombycis; 昆虫培養細胞系; HeLa 53 細胞系; 宿主細胞適合性; ストレスタンパク質; 胞子表面抗原; カイコ病原性微胞子虫; HeLa S3細胞系; 微胞子虫増殖阻害; 超微形態

カイコ微粒子病病原Nosenma bombycis NIS OO1株胞子を,広範囲(25℃〜37℃)の温度条件下で培養可能な鱗翅目ヤガ科昆虫由来Spacibptera frugipeda NIAS-Sf-D1細胞系およびヒト子宮頸部癌由来HeLa S-3細胞系へ接種し,27℃または37℃で培養した。胞子接種7日後の感染培養からタンパク質を抽出し,各組み合わせと各培養温度下でのタンパク質発現の変化を,1次元及び2次元電気泳動により解析した。Sf-D1細胞系は微胞子虫非感染下でも培養温度によって異なるタンパク質発現パターンを示し,37℃では20〜30KDa程度のタンパク質が減少する一方で,約63KDaタンパク質の発現の増強が認められた。微胞子虫感染特異的に発現するタンパク質について,27℃培養区では,HeLa S-3細胞系では微胞子虫が感染増殖するにもかかわらずタンパク質動態の変化は全く認められなかったが,Sf-D1細胞系においては約27 Kdaのタンパク質が新たに誘導された。また37℃培養区では,Heda S-3細胞系においてのみ約40 Ma及び70 Kdaのタンパク質の発現が認められ,本微胞子虫の感染は成立しないものの,胞子発芽からスポロプラズムの宿主細胞侵入が,これらストレスタンパク質誘導の一因となっている可能性が示唆された。また,本微胞子虫胞子表面抗原に特異的なIgG抗体を供試し,免疫染色により胞子表面抗原の動態を光学顕微鏡および電子顕微鏡を用いて解析した。胞子表面抗原は生活環を通して普遍的に存在するものではなく,その発現はenvironmental sporeが形成される時期と重なっていた。一方, primary sporeには抗原抗体反応は認められず,これら二型胞子がその役割だけでなく抗原的にも全く異なることが明らかとなった。

源自休闲翼窦NIAS-SF-D1细胞，nisma bombycis nis oo1，可以在宽范围（25°C至37°C）下培养的百合物，源自休闲翼窦NIAS-SF-D1细胞，源自休闲翼窦NIAS-SF-D1细胞，源自休闲翼窦NIAS-SF-D1细胞，源自鼻nias-sf-d1细胞和人体宫颈癌，弗鲁吉帕蛋白nias-sf-d1细胞和人体宫颈癌来源S-3与细胞接种，并在27°C或37°C中培养。孢子接种后七天从感染的培养物中提取蛋白质，每种组合和每种培养温度下的蛋白质表达变化均通过一个维度和两个维度电子游泳分析。 SF-D1细胞系统表示蛋白质表达模式的不同，具体取决于培养温度，即使在未感染了酿酒板的情况下，在37°C下，蛋白质的蛋白质约为20至30 kDa，而蛋白质降低了，而蛋白质的增加则增加了观察到约63KDA蛋白的表达。关于在27°C培养区域中特定表达的蛋白质，尽管在HELA S-3细胞系统中碳酸氢碳纤维增殖，但在D1细胞中，蛋白质运动没有变化。系统，新诱导了约27 kDa蛋白。在37°C培养区域中，仅在HEDA S-3细胞系统中观察到了约40 mA和70 kDa的蛋白质的表达，尽管未建立这种体积昆虫的感染，但已经从孢子中萌发了这种孢子。发芽。这可能是这些压力 - 蛋白质指导之一。此外，还提供了针对该杂化虫害农药表面抗原的IgG抗体，并使用免疫糖类使用光学显微镜和电子显微镜分析了孔表面抗原的动力学。孢子表面抗原在整个活环中并不普遍存在，其表达与环境孢子的形成重叠。另一方面，一孢子没有抗原抗体反应，并且发现这些2型孢子不仅在其作用中，而且在抗原中。