アポトーシス抑制分子FLIPの新規機能解析

凋亡抑制剂分子FLIP的新功能分析

• 批准号: 05J11599
• 负责人: 片山 量平
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05J11599/
• 关键词: アポトーシス; 増殖シグナル; 細胞癌化

これまでの研究から我々は、アポトーシス抑制分子として代表される分子FLIPがWntシグナルを増強するという新しい機能を見出してきた。このFLIPがWntシグナリングを増強するという機能について、分子メカニズムを明らかにするために、FLIPのどのドメインがWntシグナリング活性化に重要なのかについて検討した。その結果、FLIPのC末端領域には核移行シグナル(NLS)に類似した配列があることを見出した。さらに、これまで細胞質蛋白質と考えられてきたFLIPが、核にも局在することを見出した。FLIPの変異体を作成し解析した結果、FLIP-LのC末端近傍に存在するNLS類似配列はFLIPの核局在に重要であるだけでなく、FLIP-LによるWntシグナリングの増強にも重要であることを明らかにした。そこで、FLIP-Lの核局在がWntシグナルの増強に関与するかを、FLIP-LのN末端側に核外排出シグナル(NES)を付加したNES-FLIP-Lを作製し、検討した。その結果、NES-FLIP-Lは主に細胞質に局在し、Wntシグナル増強活性は顕著に減弱した。この結果から、FLIP-Lの局在制御(核局在)がFLIP-LによるWntシグナリングの増強という機能にとって重要であることが強く示唆された。また、FLIPの新規機能解明を目的としてFLIPのC末端領域に結合する蛋白質を探索し、数種類の結合蛋白を見出した。それぞれの結合蛋白質についての解析は目下進行中であり、FLIPの未知機能の解明が期待できる。

从以前的研究中，我们发现了FLIP的新功能，Flip是一种代表凋亡抑制剂分子的分子，以增强Wnt信号。为了阐明FLIP功能以增强Wnt信号传导的分子机制，我们研究了哪些翻转域对于Wnt信号激活很重要。结果，我们发现在FLIP的C末端区域中存在类似于核转运信号（NLS）的序列。此外，发现被认为是细胞质蛋白的翻转也位于细胞核上。产生和分析的翻转突变体，我们透露，位于Flip-L的C端附近的NLS样序列不仅对于FLIP的核定位，而且对于增强Flip-L的Wnt信号传导也很重要。因此，我们研究了FLIP-L的核定位是否通过产生NES-FLIP-L参与增强Wnt信号，而NES-FLIP-L伴随着Flip-L的N末端的排泄信号（NES）。结果，NES-FLIP-L主要定位在细胞质中，其Wnt信号增强活性显着降低。这些结果强烈表明，FLIP-L（核定位）的定位对于通过FLIP-L增强WNT信号传导的功能很重要。此外，为了阐明翻转的新功能，我们搜索了与翻转C末端区域结合的蛋白质，并发现了几种类型的结合蛋白。目前正在进行每种结合蛋白的分析，预计翻转功能将被阐明。