神経ペプチドの人および家畜の炎症性腸疾患の免疫制御に関する役割解明

阐明神经肽在人类和牲畜炎症性肠病免疫调节中的作用

• 批准号: 05F05649
• 负责人: 百溪 英一 (2006)
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: National Agriculture and Food Research Organization
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05649/
• 关键词: 牛; 神経ペプチド; 副腎皮質ホルモン; ヨーネ病; ウロコルチン; CRH; cDNA; mRNA; ウロコルチン(Ucn); コルチコトロピン放出因子(CRF); ヨーネ菌; クローン病; Th1型細胞性免疫; 炎症性腸疾患; クローニング

ヨーネ病は家畜の法定伝染病で最も重要な疾病で、不顕性感染ウシの免疫学的メカニズムの解明が早期診断や防疫に重要である。また、ヨーネ菌と人の難病疾患クローン病の関係も示唆されてきた、公衆衛生上比較研究を加速する必要もある。本研究では免疫抑制に関与していると思われる神経ペプチド、特にウロコルチンの局在の確認や動態の解明を遺伝子クローニングや機能解析を通じて行い、家畜疾病や人の関連疾病の予防、診断、治療などに資することが本研究の目的である。当該研究ではウロコルチン(UCN)のcDNAのクローニングを行い、アミノ酸配列を明らかにした。このことにより、牛UCNの遺伝子発現レベルの定量的測定が可能になった。アミノ酸配列を人、マウス、ラットで報告されているUCNの配列と比較すると、それぞれ83.721%、81.395%と79.070%の相同性を示し、成熟ペプチド領域では95%の相同性を示した。感染牛と健康牛由来の血液細胞をヨーネ菌抗原で刺激したところ、ヨーネ菌感染牛の血液においてのみUCNの発現が低下する現象を明らかにした。この現象はヨーネ病診断の新たなパラメーターとなることから特許申請した。本研究ではUCNの場合と同様の技術を用いて、牛ウロコルチン2(Ucn2)のシークエンス分析も行いcDNAのクローニングを完了した。UCN2のcDNAは399の塩基対からなる翻訳領域(ORF)、そして、113のアミノ酸をコードする事が明らかとなった。予測されたアミノ酸配列は、ヒト、ネズミとラットのアミノ酸配列とそれぞれ72.072%、62.5%と61.607%の相同性を示した。また、ウロコルチン3(Ucn3)のシークエンス分析も行い、cDNAのクローニングに成功した。cDNAは495の塩基対の牛Ucn3の翻訳領域(ORF)と、167のアミノ酸をコードすることがわかった。予測されたアミノ酸配列は、人とマウスのアミノ酸配列と比較し、64.458%と60.479%の相同性を示していた。これらの神経ペプチドの生理的機能や病理発生における関与などの研究に役立つ結果である。

Yone病是牲畜法律传染病的最重要疾病，阐明亚引发感染的免疫机制对于早期诊断和流行病很重要。还必须加速公共卫生比较研究，这在Yone细菌与一个人棘手的疾病Chlone病之间的关系中也提出了建议。在这项研究中，通过遗传克隆和功能分析，被认为参与免疫持有的神经肽，确认量表的定位和阐明动力学以及预防，诊断和治疗牲畜疾病和人类相关疾病这项研究是为了贡献。在这项研究中，进行了cDNA（UCN）（UCN）的克隆，并揭示了氨基酸序列。这允许定量测量牛UCN的遗传表达水平。与人类，小鼠和大鼠报道的UCN阵列相比，它显示83.721％，81.395％和79.070％的UCN家乡，并显示95％的成熟肽区域。感染的牛和保健奶牛衍生的血细胞用Yone细菌抗原的现象，即UCN表达仅在Voctimate细菌感染的牛的血液中降低的现象。这种现象被应用于专利，因为它已成为Yone疾病诊断的新参数。在这项研究中，使用与UCN相同的技术完成了cDNA克隆，并进行了牛肉皮质氨酸2（UCN2）的序列分析。据显示，UCN2 cDNA编码了一个由399个碱基对和113个氨基酸组成的翻译区域（ORF）。预测的氨基酸序列分别显示了人类，大鼠和大鼠的氨基酸序列，分别为72.072％，62.5％和61.607％。他还对泌尿科素3（UCN3）进行了序列分析，并成功地克隆了cDNA。发现该cDNA编码495个基本牛UCN3和167氨基酸的翻译区域（ORF）。预测的氨基酸序列显示人类和小鼠的氨基酸序列的64.458％和60.479％。研究这些神经肽的生理功能和病理发生的参与是有用的结果。

项目成果

「ヨーネ病診断用プライマーおよびウロコルチン遺伝子の発現定量法によるヨーネ病の診断法」

“使用用于诊断约内氏病的引物的约内氏病诊断方法和尿皮质素基因表达定量方法”

• 发表时间: 2005

Cloning and Characterization of Bovine Urocortin

牛尿皮质素的克隆和表征

• 发表时间: 2005
• 期刊: 第28回日本分子生物学会抄録
• 作者: Hongyu Wang;et al.
• 通讯作者: et al.

Corticotropin-releasing hormone and urocortin expression in peripheral blood cells from experimentally infected cattle with Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis

实验感染鸟分枝杆菌亚种的牛的外周血细胞中促肾上腺皮质激素释放激素和尿皮质素的表达。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Microbes and Infection (in press)
• 作者: Hongyu Wang;Aodon-geril;Yujing Shu;Yuriko Momotani;Xiaofei Wang;Yasuyuki Mori;Eiichi Momotani
• 通讯作者: Eiichi Momotani