肥満細胞における新規アダプター分子SITの役割

新型接头分子SIT在肥大细胞中的作用

基本信息

批准号：
16790669
负责人：
内田隆文
金额：
$ 1.86万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

近年わが国でも急速にアレルギー性疾患(喘息、花粉症、アトピー性皮膚炎など)の増加が認められる。肥満細胞が脱顆粒を起こすことが、これらの病態形成に中心的な役割をはたすことが知られている。代表研究者らはこれまで高親和性IgEレセプターであるFc・RIを中心に、肥満細胞の脱顆粒とアトピー疾患とのかかわりを明らかにしてきた。近年LATなどのIII型膜蛋白が、脱顆粒などのシグナル伝達の足場として重要であることが明らかとなっている。新規III型膜蛋白であるSIT (SHP2-interacting Transmembrane Adaptor Protein)と肥満細胞における機能の解明を試みた。SITが各種肥満細胞(Human, Mouse, Rat cell line. Mouse primary cell, Mouse bone marrow derived cell)に発現していることを確認した。データーベース上になかったためrat homologをクローニングした。rSITはhuman SIT, mouse SITと90%以上のホモロジーがあった。機能解析のためRBL-2H3細胞に強制発現させたところ、Stable transfectantを樹立することが出来なかった。恒常的に機能している分子は強制発現細胞株を得ることが出来ないことが多い。RBL-2H3細胞に一過性に発現させたがβ-hexosaminidase release assayによる脱顆粒に差はなかった。

近年来，日本的过敏性疾病（哮喘，花粉症，特应性皮炎等）迅速增加。众所周知，肥大细胞的脱粒在这些病理学的形成中起着核心作用。领先的研究人员先前已经阐明了肥大细胞脱粒与特应性疾病之间的关系，该疾病的重点是FC和RI，这是一种高亲和力IgE受体。近年来，已经揭示出III型膜蛋白（如LAT）很重要，就像诸如脱粒之类的信号传导的支架。我们试图阐明SIT（SHP2相互作用的跨膜衔接蛋白），一种新型III型膜蛋白和肥大细胞的功能。已证实SIT在各种肥大细胞（人，小鼠，大鼠细胞系。小鼠原发细胞，小鼠骨髓衍生细胞）中表达。将大鼠同源物克隆出来，因为它不在数据库上。 RSIT具有人类坐姿和鼠标坐姿的同源性。当细胞被迫在RBL-2H3细胞上表达细胞进行功能分析时，未建立稳定的转染剂。组成型功能分子通常无法获得强制表达的细胞系。尽管细胞在RBL-2H3细胞中瞬时表达，但β-己糖胺酶释放分析的脱粒物没有差异。